2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、肝癌在我國癌癥發(fā)病率中居第二位,目前對中、晚期及復發(fā)性肝癌尚無特效治療藥物。中醫(yī)藥綜合治療因能改善患者臨床癥狀,延長生存期,改善生活質量而倍受關注。近年來中醫(yī)藥抗肝癌研究取得一定成績,但其機制仍未完全明晰。因此,探索中醫(yī)藥抗肝癌機制,對臨床肝癌的治療,以及篩選高效、低毒的抗肝癌中藥有效成分均具有重要的意義。
   目的:觀察歸肝經(jīng)中藥對體外HepG2細胞增殖及凋亡的影響,初步探討歸肝經(jīng)中藥抗肝癌作用的趨向性。
   方法

2、:
   1. 歸肝經(jīng)中藥選取莪術、水蛭、丹參;非歸肝經(jīng)中藥選取白花蛇舌草為對照。采用揮發(fā)油法提取莪術油,水提醇沉法制備丹參、白花蛇舌草提取物;采用水提醇沉法及液氮快速凍融法提取水蛭提取物。高效液相色譜法鑒定丹參、白花蛇舌草提取物含量,揮發(fā)油含量測定莪術油,并對比水蛭提取物的兩種制備方法。
   2.采用MTT法檢測歸肝經(jīng)中藥莪術、水蛭、丹參提取物對HepG2細胞的增殖抑制作用,以非歸肝經(jīng)中藥白花蛇舌草提取物、空白組為對

3、照,根據(jù)直線回歸方程計算達到半數(shù)抑制率(IC50)所對應的提取物藥物濃度與生藥量,并以IC50對應的提取物藥物濃度作為下一步實驗的工作濃度。
   3.采用細胞計數(shù)法、流式細胞術檢測、吖啶橙熒光染色并分析比較歸肝經(jīng)中藥莪術、水蛭、丹參提取物與非歸肝經(jīng)中藥白花蛇舌草提取物在IC50藥物濃度下對HepG2 細胞生長的影響及誘導凋亡的差異性。
   結果:
   1.丹參、白花蛇舌草水提醇沉法提取物的高效液相色譜法鑒定

4、含量分別為丹參酮IIA 0.403mg/g,熊果酸0.212%,揮發(fā)油含量測定莪術中莪術醇、莪術酮含量分別為11.70%、5.20%,均符合制備標準。水蛭兩種方法制備后經(jīng)高效液相色譜檢測,液氮快速凍融法提取的成分含量要顯著高于水提醇沉法。
   2.MTT法檢測結果顯示:莪術油IC50藥物濃度值為4.992μg/mL,相當于生藥1.543mg/mL ; 水蛭提取物IC50 藥物濃度值為4.0018mg/mL,相當于生藥15.69

5、mg/mL; 丹參提取物的IC5 0藥物濃度值為8.007mg/mL,相當于生藥22.81mg/mL;白花蛇舌草提取物的IC50藥物濃度值為25.04mg/mL,相當于生藥259.75mg/mL。白花蛇舌草提取物IC50藥物濃度所對應生藥量是丹參提取物的11.39 倍,水蛭提取物的16.56 倍,莪術油的168.38 倍。
   3.IC50藥物濃度作用下HepG2細胞生長計數(shù)結果顯示:24h時,莪術提取物處理后細胞數(shù)減少,其他

6、中藥提取物生長抑制作用不明顯;48h、72h時,歸肝經(jīng)中藥莪術、水蛭、丹參提取物抑制HepG2細胞生長作用強于非歸肝經(jīng)中藥白花蛇舌草提取物,三種提取物之間作用無明顯差異。
   4.流式細胞術檢測結果顯示:IC50藥物濃度處理24h時,莪術、丹參提取物誘導凋亡作用強于白花蛇舌草、水蛭提取物;處理48h、72h時,歸肝經(jīng)中藥莪術、水蛭、丹參提取物誘導HepG2 細胞凋亡率高于非歸肝經(jīng)中藥白花蛇舌草提取物,其中48h莪術提取物作用強

7、于丹參、水蛭提取物,72h時莪術、水蛭提取物作用強于丹參提取物。細胞周期檢測結果顯示水蛭、丹參提取物可阻止HepG2 細胞從G0/G1期進入S期,莪術提取物則使HepG2細胞被阻滯在S期,白花蛇舌草提取物對HepG2細胞周期無明顯影響。
   5.吖啶橙熒光染色:IC50藥物濃度處理后,HepG2細胞均可見典型的凋亡細胞形態(tài)學改變,歸肝經(jīng)中藥提取物明顯,而非歸肝經(jīng)中藥白花蛇舌草提取物相對較少。
   結論:
  

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