紫花牡荊素誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、目的:研究紫花牡荊素（Casticin）對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)的作用,并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法:用終濃度為（0、0.5、1.0、2.0）μmol/L的紫花牡荊素及10μmol/L5-FU作用于HepG2細(xì)胞,其中0μmol/L紫花牡荊素為陰性對(duì)照組，于12h、24h、48 h后采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率；作用24 h后收集各組肝癌HepG2細(xì)胞,應(yīng)用Hoechst33342核染色,觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；

2、應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)AV-PI法和DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)肝癌HepG2細(xì)胞的凋亡；RT-PCR檢測(cè)肝癌HepG2細(xì)胞survivin、Bcl-2mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:MTT法檢測(cè)顯示,終濃度為0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L紫花牡荊素及10μmol/L5-FU處理人肝癌 HepG2細(xì)胞48h后,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率分別為(38.15±1.72)％、(57.67±0.47)%、(71.88±2.04)%、(53.

3、41±1.34)%,并存在時(shí)間和濃度依賴關(guān)系(P<0.01,P<0.05)；紫花牡荊素作用24h后,Hoechst33342染色,可見核染色質(zhì)凝集,凋亡細(xì)胞呈致密濃染,與陰性對(duì)照組相比,紫花牡荊素處理后凋亡細(xì)胞比例增加；流式細(xì)胞術(shù)AV-PI法檢測(cè)早期凋亡可見隨藥物濃度的增加,細(xì)胞凋亡率逐漸增加(P<0.05);DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)肝癌HepG2細(xì)胞凋亡,顯示有特征性的DNA梯度條帶形成,說明DNA斷裂,細(xì)胞凋亡；RT-PCR結(jié)果顯示