海人酸誘導(dǎo)癲癇大鼠的海馬微血管的改變.pdf

1、背景：癲癇(epilepsy)是由多種病因引起的腦功能障礙綜合征，是腦細(xì)胞群異常的超同步放電而引起的發(fā)作性、突然的、暫時(shí)性的腦功能紊亂。海人酸(KA)是腦內(nèi)興奮性氨基酸遞質(zhì)一谷氨酸的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物。海人酸模型已廣泛用于癲癇發(fā)作的研究。海馬是腦內(nèi)對(duì)最缺血敏感的區(qū)域之一。上世紀(jì)初Scharrer等就指出海馬結(jié)構(gòu)的易損性主要?dú)w因于其血液供應(yīng)的獨(dú)特方式。辜清等已在掃描電鏡下觀察到聽(tīng)源性癲癇大鼠海馬內(nèi)存在微血管病變。 目的：本文采用堿性磷酸酶

2、法對(duì)KA癲癇模型中海馬CA1區(qū)的微血管分布密度進(jìn)行定量觀察，以探求海馬微血管構(gòu)筑在顳葉癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用，為癲癇發(fā)病機(jī)制研究提供基礎(chǔ)資料。 方法：(1)雄性SD大鼠 12只(1 80～250g)，分為實(shí)驗(yàn)組(KA，n=6)和對(duì)照組(NS，n=6)。(2)實(shí)驗(yàn)組大鼠頸部皮下注射KA(10mg/kg)，根據(jù)Racine[15]所描述的癲癇行為1～5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，觀察實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物全部達(dá)到4級(jí)或5級(jí)后，即認(rèn)為實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物已符合癲癇模型的要求；對(duì)

3、照組大鼠頸部皮下注射生理鹽水。(3)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物分別在給予生理鹽水或KA7d后，水合氯醛麻醉，心臟灌流固定，取腦，后固定，酒精梯度脫水，火棉膠包埋，切片(厚90 μ m)，堿性磷酸酶染色，常規(guī)封片。(4)光鏡觀察，使用Nikon microscope picture analysis system 分析軟件進(jìn)行定量分析。取右側(cè)背側(cè)海馬最大的部位，連續(xù)觀察3張切片，目標(biāo)區(qū)域?yàn)镃A1區(qū)分子層，從CAl區(qū)的內(nèi)側(cè)端開(kāi)始連續(xù)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野

4、(36300×90μm<'3>)，’}己錄每個(gè)視野的微血管數(shù)目(N)、微血管最大直徑的平均值(D)和視野內(nèi)血管的總長(zhǎng)度(L)。計(jì)算各指標(biāo)的平均值和微血管的平均長(zhǎng)度(L/N)。(5)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；應(yīng)用spss 11.5軟件的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：(1) 海馬內(nèi)微血管的分布具有與神經(jīng)組織相對(duì)應(yīng)的層次性：區(qū)各層之間微血管密度及分布的層次性最明顯，其中多形層微血管最豐富

5、，錐體層的最稀少，分子層的較稀少；CA3區(qū)中的錐體層血管密度最高，多形層次之，分子層最稀。CA4區(qū)的微血管分布沒(méi)有明顯的層次性。齒狀回的微血管分布以分子層最密，多形層次之，顆粒層最稀。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬微血管的在分布方式上未見(jiàn)差別。(2) 實(shí)驗(yàn)組血管數(shù)目為5.21±0.62，明顯高于對(duì)照組(3.56±0.76)，P=0.001；實(shí)驗(yàn)組血管平均直徑為4.25±0.23μm，明顯低于對(duì)照組(5.35±1.04μm)，P=0.030；實(shí)驗(yàn)