海人酸誘導(dǎo)癲癇大鼠的海馬微血管的改變.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:癲癇(epilepsy)是由多種病因引起的腦功能障礙綜合征,是腦細(xì)胞群異常的超同步放電而引起的發(fā)作性、突然的、暫時性的腦功能紊亂。海人酸(KA)是腦內(nèi)興奮性氨基酸遞質(zhì)一谷氨酸的結(jié)構(gòu)類似物。海人酸模型已廣泛用于癲癇發(fā)作的研究。海馬是腦內(nèi)對最缺血敏感的區(qū)域之一。上世紀(jì)初Scharrer等就指出海馬結(jié)構(gòu)的易損性主要歸因于其血液供應(yīng)的獨特方式。辜清等已在掃描電鏡下觀察到聽源性癲癇大鼠海馬內(nèi)存在微血管病變。 目的:本文采用堿性磷酸酶

2、法對KA癲癇模型中海馬CA1區(qū)的微血管分布密度進行定量觀察,以探求海馬微血管構(gòu)筑在顳葉癲癇發(fā)病機制中的作用,為癲癇發(fā)病機制研究提供基礎(chǔ)資料。 方法:(1)雄性SD大鼠 12只(1 80~250g),分為實驗組(KA,n=6)和對照組(NS,n=6)。(2)實驗組大鼠頸部皮下注射KA(10mg/kg),根據(jù)Racine[15]所描述的癲癇行為1~5級標(biāo)準(zhǔn),觀察實驗組動物全部達到4級或5級后,即認(rèn)為實驗組動物已符合癲癇模型的要求;對

3、照組大鼠頸部皮下注射生理鹽水。(3)對照組和實驗組動物分別在給予生理鹽水或KA7d后,水合氯醛麻醉,心臟灌流固定,取腦,后固定,酒精梯度脫水,火棉膠包埋,切片(厚90 μ m),堿性磷酸酶染色,常規(guī)封片。(4)光鏡觀察,使用Nikon microscope picture analysis system 分析軟件進行定量分析。取右側(cè)背側(cè)海馬最大的部位,連續(xù)觀察3張切片,目標(biāo)區(qū)域為CA1區(qū)分子層,從CAl區(qū)的內(nèi)側(cè)端開始連續(xù)計數(shù)5個高倍視野

4、(36300×90μm<'3>),’}己錄每個視野的微血管數(shù)目(N)、微血管最大直徑的平均值(D)和視野內(nèi)血管的總長度(L)。計算各指標(biāo)的平均值和微血管的平均長度(L/N)。(5)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示;應(yīng)用spss 11.5軟件的單因素方差分析(one-way ANOVA)進行統(tǒng)計;P<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:(1) 海馬內(nèi)微血管的分布具有與神經(jīng)組織相對應(yīng)的層次性:區(qū)各層之間微血管密度及分布的層次性最明顯,其中多形層微血管最豐富

5、,錐體層的最稀少,分子層的較稀少;CA3區(qū)中的錐體層血管密度最高,多形層次之,分子層最稀。CA4區(qū)的微血管分布沒有明顯的層次性。齒狀回的微血管分布以分子層最密,多形層次之,顆粒層最稀。對照組和實驗組大鼠海馬微血管的在分布方式上未見差別。(2) 實驗組血管數(shù)目為5.21±0.62,明顯高于對照組(3.56±0.76),P=0.001;實驗組血管平均直徑為4.25±0.23μm,明顯低于對照組(5.35±1.04μm),P=0.030;實驗

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