力達霉素輔基蛋白對腫瘤組織細胞的結(jié)合作用研究.pdf

1、力達霉素是由一個輔基蛋白質(zhì)和一個發(fā)色團組成的烯二炔類抗腫瘤抗生素，在體外對腫瘤細胞顯示出極強的細胞毒作用。其發(fā)色團對腫瘤細胞有殺傷作用，而其輔基蛋白有保護和穩(wěn)定發(fā)色團的作用。輔基蛋白對各類腫瘤細胞是否有結(jié)合作用，目前尚未見報導。因此本實驗研究力達霉素輔基蛋白(LDP)在體外對腫瘤組織細胞是否有結(jié)合作用。 本實驗第一部分是用異硫氰酸熒光素酯(FITC)對LDP進行標記。將LDP與FITC在堿性條件下反應，產(chǎn)物經(jīng)葡聚糖凝膠G15過濾

2、和半透膜透析純化后，并經(jīng)基質(zhì)輔助激光解吸電離一飛行時間(MAI.DI-TOF)質(zhì)譜檢測產(chǎn)物，結(jié)果顯示FTIC與LDP實現(xiàn)偶聯(lián)(以下稱FITC-LDP偶聯(lián)物)，偶聯(lián)分子比為1:1。 本實驗第二部分是研究FITc-LDP偶聯(lián)物與腫瘤組織細胞是否有特異性的結(jié)合作用。將FITc-LDP偶聯(lián)物與臨床常見的腫瘤組織如肺癌、胃癌、胰腺癌、直腸癌和乳腺癌新鮮冰凍組織標本孵育(37℃，30min)，通過熒光顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)FITC-LDP偶聯(lián)物與

3、乳腺癌組織細胞有特異性結(jié)合。將FITC-LDP偶聯(lián)物與20例確診的乳腺癌石蠟標本進行孵育，按熒光強弱程度將染色結(jié)果分成陽性、可疑、陰性3級，結(jié)果顯示FITC-LDP偶聯(lián)物陽性染色11例，可疑4例，陰性5例。將乳腺癌生物學指標如Her2、ER、P53、Bc1-2、：PCNA、MRP、PR、nm23的免疫組化染色結(jié)果同樣分成陽性、可疑、陰性3級，來考察FITC-LDP偶聯(lián)物熒光染色結(jié)果與上述免疫組化的染色結(jié)果是否存在相關(guān)性，結(jié)果顯示，F(xiàn)IT

4、C-LDP偶聯(lián)物染色結(jié)果與ER、P53和Bc1-2染色結(jié)果分別經(jīng)Kappa一致性檢驗，均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。FITC-LDP偶聯(lián)物熒光染色結(jié)果與ER、P53和Bc1-2免疫組化染色結(jié)果，經(jīng)Spearman等級相關(guān)性檢驗，分別呈負相關(guān)(P<0.05)、正相關(guān)(PO.05)。FITC-LDP偶聯(lián)物熒光染色結(jié)果與其它生物學指標如Her2、PCNA、MRP、PR、nm23的免疫組化染色結(jié)果均無一致性和等級相關(guān)