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文檔簡介
1、本文作者在中空纖維液相微萃取(hollowfiberliquidphasemicroextraction,HFLPME)對中藥活性成分分析研究基礎(chǔ)上,首次提出并建立了中空纖維脂質(zhì)體微篩選結(jié)合高效液相色譜法(hollowfiberliposomemicroscreeningwithhighperformanceliquidchromatography,HFLMS-HPLC)研究中藥提取液中透膜化合物的新方法。在對空白和脂質(zhì)體中空纖維表面性
2、質(zhì)表征的基礎(chǔ)上,對中空纖維活性中心與目標(biāo)物的非特異性結(jié)合和HFLMS-HPLC方法的重現(xiàn)性進(jìn)行了研究;利用HFLMS-HPLC分別對中藥材蛇床子、補(bǔ)骨脂、羌活、獨活提取液中透過脂質(zhì)體的香豆素類成分群和五味子提取液中透過脂質(zhì)體的木脂素類成分群進(jìn)行了篩選和捕獲;通過與標(biāo)準(zhǔn)品的色譜保留時間對照,對篩選出與脂質(zhì)體膜結(jié)合的一部分化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒別。HFLMS-HPLC的成功應(yīng)用為中藥中透膜化合物的篩選和研究提供一種普適、高效、方便的新方法。
3、r> 在可透膜成分篩選的基礎(chǔ)上,應(yīng)用有機(jī)溶劑分散液液微萃取法(organicsolventdispersiveliquid-liquidmicroextraction,OS-DLLME)和離子液體分散液液微萃取法(ionicliquiddispersiveliquid-liquidmicroextraction,IL-DLLME)結(jié)合高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)
4、對中藥中8種香豆素類化合物(補(bǔ)骨脂、異補(bǔ)骨脂、佛手苷內(nèi)酯、異佛手苷內(nèi)酯、氧化前胡素、歐前胡素、蛇床子素和異歐前胡素)的含量進(jìn)行了測定,并比較了兩種微萃取方法的異同;基于富集倍數(shù)和樣品相體積之間的相關(guān)性計算出分析物的表觀分配系數(shù)和DLLME的相比。分別對OS-DLLME和IL-DLLME的實驗條件進(jìn)行了考察,在優(yōu)化的實驗條件下,OS-DLLME和IL-DLLME方法的檢測限范圍分別是0.002-0.026ng·mL-1和0.013-0.6
5、6ng·mL-1,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSDs,n=9)分別小于8.7%和8.4%,富集倍數(shù)范圍分別是145-380和130-230。測得8種香豆素類化合物的表觀油/水分配系數(shù)、離子液體/水分配系數(shù)分別在142.9-1428.6和45.0-434.8之間。OS-DLLME的平均相比是(7.1±1.7)×10-3,[C4mim][PF6]-DLLME的平均相比是(5.9±0.5)×10-3,[C6mim][PF6]-DLLME的平均相比是(5.
6、0±1.6)×10-3,[C8mim][PF6]-DLLME的平均相比是(9.7±1.1)×10-3。實驗結(jié)果表明OS-DLLME和IL-DLLME對中藥樣品中8種香豆素類化合物含量測定無顯著性差異。這兩種微萃取方法都簡單、快速、高效、廉價。但是相比IL-DLLME法,OS-DLLME法對8種分析物的萃取效率更高。
由于IL-DLLME法的萃取機(jī)理研究較少,本文還應(yīng)用紫外光譜法結(jié)合IL-DLLME法闡明IL-DLLME萃取
7、后的紫外光譜法靈敏度及IL-DLLME萃取機(jī)理。以香豆素類化合物歐前胡素為模型化合物、以紫外光譜法為研究手段,在優(yōu)化模型化合物離子液體分散液相微萃取條件下,考察了補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、佛手苷內(nèi)酯、異佛手苷內(nèi)酯、氧化前胡素、歐前胡素、異歐前胡素及蛇床子素化合物不同濃度下,在IL-DLLME萃取前后紫外吸收光譜的特征。結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)ILDLLME萃取后8種香豆素類化合物隨著濃度的增加紫外吸收峰沒有發(fā)生變化,而吸收度不同程度明顯增高。說明離子液體
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