大鼠臂叢根性撕脫傷后神經(jīng)病理性疼痛的行為學觀察和脊髓層面C-FOS,IBA-1,GFAP表達變化的實驗研究.pdf

1、目的:建立臂叢根性撕脫傷后大鼠的神經(jīng)病理性疼痛的模型,運用機械誘發(fā)痛和熱誘發(fā)痛在行為學層面上評估痛閾的變化,篩選出現(xiàn)神經(jīng)病理性疼痛的模型,后在脊髓頸膨大層面運用C-FOS、GFAP、IBA-1染色觀察與神經(jīng)病理性疼痛相關的即刻反應基因、星形膠質(zhì)細胞、小膠質(zhì)細胞的變化情況,為臨床進一步干預并治療這種疼痛提供依據(jù)。
　　 方法:建立SD大鼠后路全臂叢撕脫模型共56只(分7組:實驗組6組及對照組一組,每組8只),實驗組分為術后1天,4

2、天,7天,14天、21天、28天觀察組。術后1天,4天,7天,14天、21天、28天時采用Von-FreyFilament觀測各組大鼠雙側后肢的機械誘發(fā)痛,用熱誘發(fā)痛刺激器觀測熱誘發(fā)痛。于各時間點取材,行脊髓頸膨大切片,C-FOS蛋白DAB染色,GFAP、IBA-1免疫熒光染色,SPSS15.0軟件行統(tǒng)計分析。
　　 結果:1.一般情況:所有實驗組大鼠均手術成功取材順利,無一只死亡。
　　 2.行為學觀測結果實驗組大鼠在

3、術后1天時即出現(xiàn)雙側后肢機械痛閾的下降,后即趨于穩(wěn)定,痛閾下降的現(xiàn)象長期存在。熱誘發(fā)痛的結果顯示術后大鼠雙側后肢的熱痛閾未出現(xiàn)明顯的下降。
　　 3.C-Fos蛋白染色結果顯示:左全臂叢撕脫后大鼠頸段脊髓患側背角C-FOS表達在1天時就明顯增強,隨后在4天時持續(xù)增強,7天使開始下降,直到28天時仍舊有表達,與健側背角和正常組同側背角的差異有統(tǒng)計學意義。
　　 4.星形膠質(zhì)細胞GFAP染色結果顯示左側全臂叢撕脫后大鼠頸段脊

4、髓患側背角GFAP表達在術后1天時出現(xiàn)增強,4天時明顯增強,直至術后28天時脊髓患側背角GFAP表達與健側背角和正常組同側背角的差異仍有統(tǒng)計學意義。
　　 5.小膠質(zhì)細胞IBA-1染色結果顯示側全臂叢撕脫后大鼠頸段脊髓雙側背角IBA-1表達在1天時出現(xiàn)增強,之后表現(xiàn)為持續(xù)的增強,與正常組同側背角的差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結論:1.一側全臂叢撕脫后大鼠雙側下肢出現(xiàn)的機械誘發(fā)痛痛閾下降的現(xiàn)象,與臂叢撕脫是有相關性的,可以用

5、來作為評估神經(jīng)病理性疼痛的指標。證實后路單側全臂叢撕脫的大鼠是研究神經(jīng)病理性疼痛的可行的模型。
　　 2.C-Fos蛋白初期在左側全臂叢撕脫的大鼠患側脊髓背角的表達增強與撕脫暴力損傷相關,隨后持續(xù)表達可能與慢性疼痛有關。
　　 3.脊髓膠質(zhì)細胞激活與痛覺敏化相關能夠引起痛覺敏化的因素也可激活脊髓星形膠質(zhì)細胞,GFAP作為星形膠質(zhì)細胞活性狀態(tài)的標志,在左側全臂叢撕脫的大鼠患側脊髓背角表達自術后開始即出現(xiàn)的增強與慢性疼痛有關