三種硝苯地平口服制劑一致性評價.pdf

1、目的:評價國產(chǎn)仿制的硝苯地平緩釋片和普通片與拜耳硝苯地平緩釋片（原研藥）的一致性，包括體外一致性（硝苯地平特殊雜質(zhì)、溶出度、晶型和含量測定）評價和體內(nèi)一致性（體內(nèi)生物等效性）評價?？疾靽a(chǎn)硝苯地平口服制劑質(zhì)量，探討影響硝苯地平口服制劑質(zhì)量的因素，為藥品的生產(chǎn)及研發(fā)提供實驗依據(jù)。
　　 方法:1硝苯地平特殊雜質(zhì)檢查:建立專屬性強，靈敏度高的HPLC-MS法，色譜柱為PhenomenexC18(2)柱（150×4.6mm，5μm），

2、流動相為乙腈∶水(55∶45，v/v)，等梯度洗脫，流速為0.8mL·min-1，進樣量10μL。在規(guī)定條件下同時測定硝苯地平、硝苯地平雜質(zhì)Ⅰ和硝苯地平雜質(zhì)Ⅱ的濃度，計算硝苯地平口服制劑的雜質(zhì)含量。
　　 2硝苯地平不同制劑溶出度測定:建立專屬性強的HPLC法，色譜柱為PhenomenexC18(2)柱（150×4.6mm，5μm），流動相為乙腈∶0.3％三乙胺(60∶40，v/v)，檢測波長為333nm，流速為0.8mL·mi

3、n-1，進樣量為20μL。在規(guī)定條件下測定三種硝苯地平口服制劑的溶出度濃度，并評價其溶出相似度。
　　 3硝苯地平制劑及原料藥晶型測定:采用X-射線衍射法及差示掃描量熱法分別測定三種硝苯地平口服制劑及國產(chǎn)硝苯地平緩釋片劑原料藥晶型。
　　 4硝苯地平口服制劑含量測定:采用HPLC-MS/MS法測定三種硝苯地平口服制劑的含量及標示含量百分含量。色譜柱為DiamonsilC18(2)柱(150×4.6mm，5μm);流動相為

4、乙腈∶5mmol·L-1乙酸銨(60∶40，v/v);流速為0.8mL·min-1;進樣量為10μL;柱溫為25℃。
　　 5硝苯地平人血漿濃度測定方法的建立與評價:建立HPLC-MS/MS測定人體血漿中硝苯地平方法，色譜柱為DiamonsilC18(2)柱（150×4.6mm，5μm）;流動相為乙腈∶5mmol·L-1乙酸銨(60∶40，v/v);流速為0.8mL·min-1;進樣量為10μL;柱溫為25℃;離子源為ESI離子

5、源，負離子模式檢測;多級反應(yīng)監(jiān)測(MRM)模式，345.1→222.2（硝苯地平），150.1→107.1(對乙酰氨基酚，IS)，EMV為400V。碎片電壓均為100V，碰撞能分別為5eV和20eV?？疾旆椒ǖ膶Ｒ恍?、靈敏度、線性、精密度、準確度、穩(wěn)定性和稀釋效應(yīng)。
　　 6.硝苯地平口服制劑人體生物等效性研究:20名男性健康志愿者隨機分為兩組，雙交叉雙周期單次口服拜耳緩釋片和國產(chǎn)硝苯地平緩釋片20mg，第三周期，20名志愿者均

6、服用硝苯地平國產(chǎn)普通片20mg，于設(shè)定時間采血0.5mL，經(jīng)液-液萃取法處理，采用HPLC-MS/MS法分析血漿中硝苯地平濃度，采用DAS2.0軟件分析服用國產(chǎn)緩釋片組與拜耳緩釋片組、服用國產(chǎn)普通片組與拜耳緩釋片組的生物等效性。
　　 結(jié)果:1.三種硝苯地平片劑特殊雜質(zhì)檢查均符合2010版中國藥典質(zhì)量要求，原研藥雜質(zhì)含量明顯小于國產(chǎn)硝苯地平緩釋片與普通片劑。
　　 2.三種片劑體外溶出度考察結(jié)果顯示，兩種緩釋片均有明顯緩

7、釋效果，國產(chǎn)緩釋片釋放特點接近控釋片，拜耳緩釋片釋放特點為典型緩釋片。硝苯地平普通片劑在1h累計溶出百分含量為82.19％，符合普通制劑溶出度規(guī)定。
　　 3.三種硝苯地平口服制劑晶型結(jié)果顯示，原料藥與國產(chǎn)硝苯地平緩釋片和拜耳緩釋片主要衍射峰角度相似，提示國產(chǎn)硝苯地平與原研藥的晶型相似。國產(chǎn)硝苯地平普通片劑與其他兩種片劑的主要衍射峰角度差別較大，晶型存在差異。DSC法分析晶型結(jié)果與X-射線粉末衍射結(jié)果一致。
　　 4.三

8、種片劑的含量測定結(jié)果顯示，標示量百分含量均在90％-110％范圍內(nèi)，符合中國藥典2010版的要求。
　　 5.本課題建立測定人血漿硝苯地平濃度的HPLC-MS/MS法靈敏度高，選擇性強，精密度、準確度和穩(wěn)定性良好，適用于硝苯地平人體內(nèi)血藥濃度檢測。
　　 6.20名健康志愿者分別單次口服拜耳緩釋片（原研藥）、國產(chǎn)緩釋片和國產(chǎn)普通片后，主要藥代動力學參數(shù):t1/2分別為（6.76±2.22）h、（9.63±8.12）h和（

9、5.43±1.31）h，Tmax分別為（2.80±0.50）h、（2.70±0.47）h和（1.87±1.21）h，Cmax分別為（76.69±19.50）ng·mL-1、（75.56±17.60）ng·mL-1和（277.22±93.26）ng·mL-1，AUC0-36分別為（534.13±159.94）ng·mL-1·h、（526.68±154.83）ng·mL-1·h和（1292±602.86）ng·mL-1·h，AUC0-∞分別

10、為（551.68±174.34）ng·mL-1·h、（610.83±353.90）ng·mL-1·h和（1303.71±611.54）ng·mL-1·h。國產(chǎn)緩釋片和拜耳緩釋片具有體內(nèi)生物等效性，拜耳緩釋片和國產(chǎn)普通片體內(nèi)生物不等效，國產(chǎn)普通片的相對生物利用度過高。
　　 結(jié)論:硝苯地平兩種緩釋片劑體外一致性評價結(jié)果顯示，雜質(zhì)檢查及含量測定均符合2010版中國藥典相關(guān)規(guī)定，溶出度和晶型相似，與體內(nèi)生物等效性結(jié)果一致。硝苯地平普通