三種硝苯地平口服制劑一致性評(píng)價(jià).pdf

1、目的:評(píng)價(jià)國(guó)產(chǎn)仿制的硝苯地平緩釋片和普通片與拜耳硝苯地平緩釋片（原研藥）的一致性，包括體外一致性（硝苯地平特殊雜質(zhì)、溶出度、晶型和含量測(cè)定）評(píng)價(jià)和體內(nèi)一致性（體內(nèi)生物等效性）評(píng)價(jià)?？疾靽?guó)產(chǎn)硝苯地平口服制劑質(zhì)量，探討影響硝苯地平口服制劑質(zhì)量的因素，為藥品的生產(chǎn)及研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:1硝苯地平特殊雜質(zhì)檢查:建立專屬性強(qiáng)，靈敏度高的HPLC-MS法，色譜柱為PhenomenexC18(2)柱（150×4.6mm，5μm），

2、流動(dòng)相為乙腈∶水(55∶45，v/v)，等梯度洗脫，流速為0.8mL·min-1，進(jìn)樣量10μL。在規(guī)定條件下同時(shí)測(cè)定硝苯地平、硝苯地平雜質(zhì)Ⅰ和硝苯地平雜質(zhì)Ⅱ的濃度，計(jì)算硝苯地平口服制劑的雜質(zhì)含量。
　　 2硝苯地平不同制劑溶出度測(cè)定:建立專屬性強(qiáng)的HPLC法，色譜柱為PhenomenexC18(2)柱（150×4.6mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈∶0.3％三乙胺(60∶40，v/v)，檢測(cè)波長(zhǎng)為333nm，流速為0.8mL·mi

3、n-1，進(jìn)樣量為20μL。在規(guī)定條件下測(cè)定三種硝苯地平口服制劑的溶出度濃度，并評(píng)價(jià)其溶出相似度。
　　 3硝苯地平制劑及原料藥晶型測(cè)定:采用X-射線衍射法及差示掃描量熱法分別測(cè)定三種硝苯地平口服制劑及國(guó)產(chǎn)硝苯地平緩釋片劑原料藥晶型。
　　 4硝苯地平口服制劑含量測(cè)定:采用HPLC-MS/MS法測(cè)定三種硝苯地平口服制劑的含量及標(biāo)示含量百分含量。色譜柱為DiamonsilC18(2)柱(150×4.6mm，5μm);流動(dòng)相為

4、乙腈∶5mmol·L-1乙酸銨(60∶40，v/v);流速為0.8mL·min-1;進(jìn)樣量為10μL;柱溫為25℃。
　　 5硝苯地平人血漿濃度測(cè)定方法的建立與評(píng)價(jià):建立HPLC-MS/MS測(cè)定人體血漿中硝苯地平方法，色譜柱為DiamonsilC18(2)柱（150×4.6mm，5μm）;流動(dòng)相為乙腈∶5mmol·L-1乙酸銨(60∶40，v/v);流速為0.8mL·min-1;進(jìn)樣量為10μL;柱溫為25℃;離子源為ESI離子

5、源，負(fù)離子模式檢測(cè);多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式，345.1→222.2（硝苯地平），150.1→107.1(對(duì)乙酰氨基酚，IS)，EMV為400V。碎片電壓均為100V，碰撞能分別為5eV和20eV?？疾旆椒ǖ膶Ｒ恍浴㈧`敏度、線性、精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性和稀釋效應(yīng)。
　　 6.硝苯地平口服制劑人體生物等效性研究:20名男性健康志愿者隨機(jī)分為兩組，雙交叉雙周期單次口服拜耳緩釋片和國(guó)產(chǎn)硝苯地平緩釋片20mg，第三周期，20名志愿者均

6、服用硝苯地平國(guó)產(chǎn)普通片20mg，于設(shè)定時(shí)間采血0.5mL，經(jīng)液-液萃取法處理，采用HPLC-MS/MS法分析血漿中硝苯地平濃度，采用DAS2.0軟件分析服用國(guó)產(chǎn)緩釋片組與拜耳緩釋片組、服用國(guó)產(chǎn)普通片組與拜耳緩釋片組的生物等效性。
　　 結(jié)果:1.三種硝苯地平片劑特殊雜質(zhì)檢查均符合2010版中國(guó)藥典質(zhì)量要求，原研藥雜質(zhì)含量明顯小于國(guó)產(chǎn)硝苯地平緩釋片與普通片劑。
　　 2.三種片劑體外溶出度考察結(jié)果顯示，兩種緩釋片均有明顯緩

7、釋效果，國(guó)產(chǎn)緩釋片釋放特點(diǎn)接近控釋片，拜耳緩釋片釋放特點(diǎn)為典型緩釋片。硝苯地平普通片劑在1h累計(jì)溶出百分含量為82.19％，符合普通制劑溶出度規(guī)定。
　　 3.三種硝苯地平口服制劑晶型結(jié)果顯示，原料藥與國(guó)產(chǎn)硝苯地平緩釋片和拜耳緩釋片主要衍射峰角度相似，提示國(guó)產(chǎn)硝苯地平與原研藥的晶型相似。國(guó)產(chǎn)硝苯地平普通片劑與其他兩種片劑的主要衍射峰角度差別較大，晶型存在差異。DSC法分析晶型結(jié)果與X-射線粉末衍射結(jié)果一致。
　　 4.三

8、種片劑的含量測(cè)定結(jié)果顯示，標(biāo)示量百分含量均在90％-110％范圍內(nèi)，符合中國(guó)藥典2010版的要求。
　　 5.本課題建立測(cè)定人血漿硝苯地平濃度的HPLC-MS/MS法靈敏度高，選擇性強(qiáng)，精密度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性良好，適用于硝苯地平人體內(nèi)血藥濃度檢測(cè)。
　　 6.20名健康志愿者分別單次口服拜耳緩釋片（原研藥）、國(guó)產(chǎn)緩釋片和國(guó)產(chǎn)普通片后，主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù):t1/2分別為（6.76±2.22）h、（9.63±8.12）h和（

9、5.43±1.31）h，Tmax分別為（2.80±0.50）h、（2.70±0.47）h和（1.87±1.21）h，Cmax分別為（76.69±19.50）ng·mL-1、（75.56±17.60）ng·mL-1和（277.22±93.26）ng·mL-1，AUC0-36分別為（534.13±159.94）ng·mL-1·h、（526.68±154.83）ng·mL-1·h和（1292±602.86）ng·mL-1·h，AUC0-∞分別

10、為（551.68±174.34）ng·mL-1·h、（610.83±353.90）ng·mL-1·h和（1303.71±611.54）ng·mL-1·h。國(guó)產(chǎn)緩釋片和拜耳緩釋片具有體內(nèi)生物等效性，拜耳緩釋片和國(guó)產(chǎn)普通片體內(nèi)生物不等效，國(guó)產(chǎn)普通片的相對(duì)生物利用度過(guò)高。
　　 結(jié)論:硝苯地平兩種緩釋片劑體外一致性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，雜質(zhì)檢查及含量測(cè)定均符合2010版中國(guó)藥典相關(guān)規(guī)定，溶出度和晶型相似，與體內(nèi)生物等效性結(jié)果一致。硝苯地平普通