缺氧誘導因子-1α和血管內(nèi)皮生長因子在腎細胞癌組織中的表達及意義.pdf

1、研究背景和目的腎癌又稱腎細胞癌、腎腺癌，是最常見的腎臟實質(zhì)性腫瘤，其起病隱襲，死亡率高，根據(jù)統(tǒng)計，發(fā)病率居泌尿系腫瘤第二位。侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的生物學特征之一，腎癌也不例外，由于腎癌早期缺乏典型的臨床癥狀，大約1/4-1/3病人就醫(yī)時已有轉(zhuǎn)移，可有血行轉(zhuǎn)移，也可以經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)移。研究腎癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機制，不僅有助于為臨床判斷預后提供有價值的分子標記物，而且有助于設(shè)計和尋找抗腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的新思路和新途徑，進一步改善腎癌的預后。

2、 缺氧誘導因子(hypoxiainduciblefactor,HIF)最先由Semenza于1992年在缺氧細胞的細胞核提取物中發(fā)現(xiàn)，是在缺氧條件下廣泛存在于哺乳動物和人體內(nèi)的一種轉(zhuǎn)錄因子，廣泛參與哺乳動物細胞中缺氧誘導產(chǎn)生的特異應(yīng)答。作為介導腫瘤細胞缺氧適應(yīng)的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，HIF-1α在許多腫瘤細胞中高表達，并和腫瘤的生物學行為密切相關(guān)，已成為近年來腫瘤學研究中的一個新的熱點。 血管內(nèi)皮生長因子(vascularendo

3、thelialgrowthfactor，VEGF)是參與腫瘤血管生成的主要調(diào)控因子，其作為促血管內(nèi)皮細胞有絲分裂原，是上調(diào)血管生成的重要因子，能特異性地直接作用于血管內(nèi)皮細胞，誘導血管內(nèi)皮細胞增殖、遷徙及血管腔形成，是血管形成必不可少的因子。VEGF通過刺激血管形成而促進腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移，并與腫瘤的預后密切相關(guān)。 HIF-1α調(diào)控包括VEGF及VEGF受體編碼基因在內(nèi)的至少40多種靶基因，涉及細胞的能量代謝、血管生成、腫瘤

4、轉(zhuǎn)移、離子代謝和兒茶酚胺代謝等。HIF-1α可在基因水平上直接調(diào)控VEGF的表達，在維持腫瘤細胞的能量代謝、新血管的形成和轉(zhuǎn)移中起重要作用。大量研究表明，HIF-1α、VEGF在多種腫瘤中呈現(xiàn)高表達，其表達與腫瘤侵潤、轉(zhuǎn)移及預后密切相關(guān)。但迄今為止，對HIF-1α、VEGF在腎細胞癌中的表達及其與腎細胞癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究國內(nèi)未見報道。本研究目的是檢測HIF-1α和VEGF在腎細胞癌中的表達，探討二者間的關(guān)系及其在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用，以期尋

5、找判斷腎細胞癌轉(zhuǎn)移及估計預后可靠的分子標記物和抗腫瘤治療新靶點。 方法選取2003年1月至2004年12月在我院手術(shù)治療的腎細胞癌患者中的42例，其中男30例，女12例；左側(cè)22例，右側(cè)20例；年齡35～81歲，平均53.6歲；腫瘤直徑＞7cm13例，≤7cm29例。病理診斷：透明細胞癌27例，顆粒細胞癌15例；經(jīng)病理學檢查證實伴轉(zhuǎn)移者18例，無轉(zhuǎn)移者24例，所有患者術(shù)前均未接受放療、化療及免疫治療。同時選取10例癌旁正常腎組織

6、(遠離腫瘤邊緣＞5cm)作為對照，用免疫組織化學SABC法檢測HIF-1α及VEGF蛋白的表達。用已知陽性結(jié)腸癌切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。手術(shù)切取標本，甲醛固定，石蠟包埋，免疫組織化學具體操作按說明書染色步驟進行。HIF-1α染色：陽性細胞胞核或胞漿內(nèi)呈棕黃色顆粒著色。在高倍鏡下，對每張切片隨機選擇5個視野，計數(shù)200個細胞/視野，共計1000個。陰性：腫瘤組織完全不著色或陽性細胞數(shù)＜5％；陽性：陽性細胞數(shù)＞5％。VEG

7、F染色：以組織細胞內(nèi)出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒且著色細胞數(shù)＞25％為陽性。應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理，采用四格表及配對計數(shù)資料的x2檢驗。 結(jié)果HIF-1α主要表達于腫瘤細胞胞核，細胞質(zhì)也有表達，正常腎組織不表達。其陽性細胞主要出現(xiàn)于腫瘤邊緣或與正常組織交界處，在壞死的腫瘤組織中也可出現(xiàn)；VEGF陽性表達主要在細胞質(zhì)及膜上，部分周圍血管內(nèi)皮細胞呈弱陽性表達。本研究42例腎細胞癌組織中HIF-1α陽性24例(57.

8、1％)，與癌旁及正常組織比較有顯著性差異(P＜0.01)；VEGF陽性26例(61.9％)，與對照組(陽性表達率為20％)相比有顯著性差異(P＜0.05)。兩者表達與患者性別、年齡、腫瘤大小及病理學類型無明顯相關(guān)性。癌轉(zhuǎn)移患者與無癌轉(zhuǎn)移者HIF-1α、VEGF比較均有顯著性差異(P＜0.01)。HIF-1α和VEGF表達有相關(guān)性(Kappa=0.41，P＜0.01)。 結(jié)論1.HIF-1α在腎細胞癌組織中呈高表達，其與VEGF有