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1、目的:觀察丁香三種不同提取液(水提液、揮發(fā)油、去揮發(fā)油水提液)對(duì)小鼠疼痛及寒證大鼠形態(tài)學(xué)與體內(nèi)多種生化指標(biāo)的影響,探討丁香三種提取物與其溫?zé)崴幮约捌渖⒑雇垂πУ南嚓P(guān)性,確定丁香入煎劑的合理性。
方法:散寒止痛實(shí)驗(yàn):將小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、溶媒對(duì)照組、陽性對(duì)照組、丁香三種提取液高、低劑量組,采用扭體實(shí)驗(yàn)和熱板實(shí)驗(yàn)觀察丁香三種提取液對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響,并探討丁香三種提取液與散寒止痛功效的相關(guān)性。
溫?zé)崴幮詫?shí)驗(yàn):將大
2、鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照Ⅰ組、模型對(duì)照Ⅱ組、陽性對(duì)照組、丁香三種提取液高、低劑量組,用寒涼藥復(fù)制大鼠寒證模型,灌服丁香三種提取液,觀察大鼠的排便、毛色、舌色等形態(tài)學(xué)指標(biāo)變化;采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定尿內(nèi)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)的排出量,熒光分光光度法測(cè)定寒證大鼠尿內(nèi)兒茶酚胺(CAs)類物質(zhì)的排出量,觀察丁香三種提取液對(duì)寒證大鼠尿內(nèi)17-OHCS與CAs類物質(zhì)腎上腺素(A)、去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)排出量的影響;采
3、用放射免疫法測(cè)定寒證大鼠血清中促甲狀腺激素(TSH)的含量,酶聯(lián)免疫法測(cè)定寒證大鼠血清中多巴胺-β-羥化酶(D-β-H)的含量,觀察丁香三種提取液對(duì)寒證大鼠血清中TSH、D-β-H的影響;采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定寒證大鼠腦干中5-羥色胺(5-HT)的含量,熒光分光光度法測(cè)定寒證大鼠腦干中NE、DA的含量,觀察丁香三種提取液對(duì)寒證大鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響;采用放射免疫法測(cè)定寒證大鼠大腦皮層中cAMP、cGMP的含量,觀察丁香三種提取液對(duì)寒證大鼠腦
4、內(nèi)cAMP、cGMP的影響。
結(jié)果:散寒止痛實(shí)驗(yàn):(1)小鼠扭體實(shí)驗(yàn):丁香揮發(fā)油對(duì)醋酸所引起的小鼠扭體反應(yīng)有抑制作用(P<0.01)。(2)小鼠熱板實(shí)驗(yàn):丁香水提液高劑量組在60min,揮發(fā)油高劑量組在120min對(duì)小鼠熱板所引起的疼痛有顯著抑制作用(P<0.05)。
溫?zé)崴幮詫?shí)驗(yàn):(1)寒證大鼠形態(tài)學(xué)指標(biāo)變化:丁香三種提取液各劑量對(duì)寒證大鼠的形態(tài)學(xué)指標(biāo)均有不同程度的改善作用。(2)體內(nèi)生化指標(biāo)變化:①17-OHCS
5、排出量:丁香水提液高、低劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加寒證大鼠尿液中17-OHCS的排出量(P<0.05或P<0.01)。②CAs類物質(zhì)排出量:丁香水提液高劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加A的排出量(P<0.05或P<0.01)。丁香水提液高、低劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加NE的排出量(P<0.05或P<0.01
6、)。丁香水提液高劑量組,揮發(fā)油高劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加DA的排出量(P<0.05或P<0.01)。③對(duì)血清中TSH的影響:丁香水提液高、低劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加寒證大鼠血清中TSH的含量(P<0.05或P<0.01)。④對(duì)血清中D-β-H的影響:丁香水提液高劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加寒證大鼠血清中D-β-H的含量
7、(P<0.05或P<0.01)。⑤對(duì)腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響:丁香水提液高劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加寒證大鼠腦干內(nèi)NE的含量(P<0.05或P<0.01)。丁香水提液高、低劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著增加寒證大鼠腦干內(nèi)DA的含量(P<0.05或P<0.01)。丁香水提液高、低劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組均能顯著或非常顯著降低寒證大鼠腦干
8、內(nèi)5-HT的含量(P<0.05或P<0.01),抑制寒證大鼠腦干中5-HT的釋放。⑥對(duì)腦皮層中cAMP、cGMP的影響:丁香三種提取液對(duì)cGMP均沒有顯著的影響;丁香水提液高劑量組,揮發(fā)油高、低劑量組,去揮發(fā)油水提液高劑量組通過顯著或非常顯著增加寒證大鼠腦皮層中cAMP的含量(P<0.05或P<0.01),從而能顯著或非常顯著增加寒證大鼠大腦皮層中cAMP/cGMP的比值(P<0.05或P<0.01)。
結(jié)論:丁香揮發(fā)油對(duì)醋酸
9、所引起的疼痛有顯著抑制作用,而丁香水提液高劑量組、揮發(fā)油高劑量組對(duì)熱板所引起的疼痛有抑制作用,其他各組均無顯著差異??梢哉J(rèn)為丁香三中提取液中揮發(fā)油散寒止痛的功效最強(qiáng)。丁香三種提取液均能不同程度地增加寒證大鼠尿中17-OHCS、CAs類物質(zhì)的排出量;增加血清中TSH、D-β-H的含量;促進(jìn)寒證大鼠腦干中NE、DA的合成,抑制5-HT的釋放;促進(jìn)大腦皮層中cAMP的合成,但對(duì)cGMP沒有顯著的調(diào)節(jié)作用,通過調(diào)節(jié)cAMP合成與釋放,從而調(diào)節(jié)大
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