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文檔簡介
1、目的:觀察干姜、高良姜三種不同提取液(水提液、揮發(fā)油、去揮發(fā)油水提液)對小鼠疼痛及寒證大鼠形態(tài)學與體內(nèi)多種生化指標的影響,探討干姜、高良姜三種提取物與溫熱藥性及其散寒止痛功效的相關性。
方法:散寒止痛實驗:將小鼠隨機分為空白對照組、溶媒對照組、陽性對照組、干姜、高良姜三種提取液高、低劑量組,采用扭體實驗和熱板實驗觀察干姜、高良姜三種提取液對小鼠鎮(zhèn)痛效應的影響,并探討干姜、高良姜三種提取液與散寒止痛功效的相關性。
溫熱
2、藥性實驗:將大鼠隨機分為空白對照組、模型對照Ⅰ組、模型對照Ⅱ組、陽性對照組、干姜、高良姜三種提取液高、低劑量組,用寒涼藥復制大鼠寒證模型,灌服干姜、高良姜三種提取液,觀察大鼠的排便、毛色、舌色等形態(tài)學指標變化;采用酶聯(lián)免疫法測定尿內(nèi)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)的排出量,熒光分光光度法測定寒證大鼠尿內(nèi)兒茶酚胺(CAS)類物質(zhì)的排出量,觀察干姜、高良姜三種提取液對寒證大鼠尿內(nèi)17-OHCS與CAS類物質(zhì)腎上腺素(A)、去甲腎上腺素(
3、NE)、多巴胺(DA)排出量的影響;采用放射免疫法測定寒證大鼠血清中促甲狀腺激素(TSH)的含量,酶聯(lián)免疫法測定寒證大鼠血清中多巴胺-β-羥化酶(DβH)的含量,觀察干姜、高良姜三種提取液對寒證大鼠血清中TSH、DβH的影響;采用酶聯(lián)免疫法測定寒證大鼠腦干中5-HT的含量,熒光分光光度法測定寒證大鼠腦干中NE、DA的含量,觀察干姜、高良姜三種提取液對寒證大鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響;采用放射免疫法測定寒證大鼠大腦皮層中cAMP、cGMP的含量
4、,觀察干姜、高良姜三種提取液對寒證大鼠腦內(nèi)cAMP、cGMP的影響。
結(jié)果:散寒止痛實驗:⑴小鼠扭體實驗:干姜三種提取液;高良姜水提液、去揮發(fā)油水提液對醋酸所引起的小鼠扭體反應均有抑制作用(P<0.05或 P<0.01)。⑵小鼠熱板實驗:干姜、高良姜三種提取液各劑量對熱板所引起的疼痛沒有顯著的抑制作用。
溫熱藥性實驗:⑴寒證大鼠形態(tài)學指標變化:干姜、高良姜三種提取液各劑量對寒證大鼠的形態(tài)學指標均有不同程度的改善作用。
5、⑵體內(nèi)生化指標變化:①17-OHCS排出量:干姜揮發(fā)油高、低劑量,水提液高、低劑量;高良姜揮發(fā)油高、低劑量,去揮發(fā)油水提液高、低劑量能增加寒證大鼠尿液中17-OHCS的排出量(P<0.05或P<0.01)。②CAS類物質(zhì)排出量:干姜揮發(fā)油高劑量,水提液高、低劑量;高良姜水提液高劑量,去揮發(fā)油水提液高、低劑量均能增加 A的排出量(P<0.05或 P<0.01)。干姜揮發(fā)油高、低劑量,水提液高、低劑量;高良姜水提液高、低劑量,去揮發(fā)油水提液
6、高、低劑量均能增加NE的排出量(P<0.05或P<0.01)。干姜揮發(fā)油高,水提液高;高良姜水提液高劑量均能增加DA的排出量(P<0.05或P<0.01)。③對血清中TSH的影響:干姜水提液高、低劑量,揮發(fā)油高劑量,去揮發(fā)油水提液高、低劑量;高良姜三種提取液各劑量都可以增加寒證大鼠血清中 TSH的含量(P<0.05或 P<0.01)。④對血清中DβH的影響:干姜水提液高劑量、揮發(fā)油高、低劑量、去揮發(fā)油高劑量;高良姜三種提取液各種劑量均能
7、增加寒證大鼠血清中DβH的含量(P<0.05或P<0.01)。⑤對腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響:干姜三種提取液高、低劑量,高良姜水提液高劑量、揮發(fā)油高劑量、去揮發(fā)油水提液高、低劑量均能增加寒證大鼠腦干內(nèi)NE的含量(P<0.05或P<0.01)。干姜水提液高劑量、去揮發(fā)油水提液高劑量,高良姜去揮發(fā)油水提液高劑量能增加寒證大鼠腦干內(nèi)DA的含量(P<0.05或P<0.01)。干姜水提液高、低劑量、揮發(fā)油高劑量、去揮發(fā)油水提液高、低劑量,高良姜水提液高、
8、低劑量、揮發(fā)油高劑量、去揮發(fā)油水提液高劑量能降低寒證大鼠腦干內(nèi)5-HT的含量,抑制寒證大鼠腦干中5-HT的釋放。⑥對腦皮層中cAMP、cGMP的影響:干姜水提液高、低劑量、揮發(fā)油高劑量、去揮發(fā)油水提液高劑量,高良姜水提液高劑量、揮發(fā)油高劑量、去揮發(fā)油水提液高、低劑量通過增加寒證大鼠腦皮層中 cAMP的含量(P<0.05或P<0.01)、從而增加寒證大鼠大腦皮層中cAMP/cGMP的比值(P<0.05或P<0.01)。干姜、高良姜三種提取
9、液對cGMP沒有顯著影響。
結(jié)論:干姜、高良姜三種提取液對醋酸所引起的疼痛有一定的抑制作用,而對熱板所引起的疼痛沒有抑制作用。干姜、高良姜三種提取液均具有不同強度的散寒止痛的功效,其中以水提液的散寒止痛作用最強。干姜、高良姜三種提取液均能不同程度地增加寒證大鼠尿中17-OHCS、CAS類物質(zhì)的排出量;增加血清中 TSH、DβH的含量;促進寒證大鼠腦干中NE、DA的合成,抑制5-HT的釋放;促進大腦皮層中cAMP的合成,但對cG
10、MP沒有顯著的調(diào)節(jié)作用,通過調(diào)節(jié)cAMP合成與釋放,從而調(diào)節(jié)大腦皮層中cAMP和cGMP的比例平衡。干姜、高良姜三種提取液與溫熱藥性及其散寒止痛功效存在一定相關性,其中水提液的相關性更密切。提示干姜、高良姜中具有溫熱藥性的有效成分不只一種,其溫熱藥性是干姜、高良姜中所有有效成分綜合作用的體現(xiàn)。水提液具有的溫熱藥性最強,揮發(fā)油與去揮發(fā)油水提液的溫熱藥性較弱。推測中藥藥性可能因有效成分的分離而拆分。我們認為干姜、高良姜揮發(fā)油與去揮發(fā)油水提液
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