多發(fā)性硬化患者血清三種miRNA與VEGF的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的：
　　多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性炎癥性脫髓鞘疾病，其發(fā)病原因不明，以空間和時(shí)間的多發(fā)性為其特征表現(xiàn)。對(duì)于MS的病因，目前尚缺乏確切的研究，相關(guān)流行病學(xué)資料研究顯示MS是一種多因素綜合作用的疾病，其中免疫調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂在其發(fā)病過程中起重要的核心作用。近來研究發(fā)現(xiàn)由血管內(nèi)皮生長因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)參與的血腦屏

2、障破壞、血管新生在MS的病程中具有重要作用，可能是MS病程呈慢性炎性脫髓鞘的主要原因。
　　微小 RNA（microRNA，miRNA）是一類在人體內(nèi)正常表達(dá)的短鏈非編碼RNA，在細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及血管新生中具有重要的調(diào)控作用。近來研究顯示在MS患者外周循環(huán)中可以檢測到多種穩(wěn)定表達(dá)的miRNA，且發(fā)現(xiàn)有多種miRNA表達(dá)量與正常對(duì)照者相比具有顯著差異。由此認(rèn)為檢測外周循環(huán)中的miRNA的表達(dá)量變化對(duì)于MS的診斷和鑒別具有重

3、要價(jià)值。本課題關(guān)注在多發(fā)性硬化復(fù)發(fā)組、緩解組和健康對(duì)照組血清中miR-199a-5p，miR-126、miR-200c和VEGF表達(dá)水平，分析MS患者各組之間miR-199a-5p，miR-126、miR-200c和VEGF的表達(dá)差異，探討它們?cè)诙喟l(fā)性硬化病程中的相關(guān)性。
　　方法：
　　1、針對(duì)45例多發(fā)性硬化復(fù)發(fā)組患者、37例多發(fā)性硬化緩解組患者和40例健康志愿者的血清標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的方法，檢測

4、三組中VEGF的表達(dá)水平變化。
　　2、針對(duì)45例多發(fā)性硬化復(fù)發(fā)組患者、37例多發(fā)性硬化緩解組患者和40例健康志愿者的血清標(biāo)本，采用qPCR的方法，分別檢測三組中 miR-199a-5p，miR-126和miR-200c的表達(dá)水平變化。
　　結(jié)果：
　　1、復(fù)發(fā)組患者血清VEGF表達(dá)量為50.75±11.31，緩解組為27.36±9.83，對(duì)照組為15.64±3.26。復(fù)發(fā)組和緩解組患者的VEGF表達(dá)量均高于對(duì)照組，且

5、差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組患者的VEGF表達(dá)量高于緩解組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2、復(fù)發(fā)組患者血清miR-199a-5p表達(dá)量為0.54±0.13,緩解組為0.73±0.22,對(duì)照組為0.74±0.39。復(fù)發(fā)組 miR-199a-5p表達(dá)量低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；緩解組 miR-199a-5p表達(dá)量低于對(duì)照組，但差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.235）；復(fù)發(fā)組 miR-19

6、9a-5p表達(dá)量較緩解組降低，且差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）。
　　3、復(fù)發(fā)組患者血清miR-126表達(dá)量為0.68±0.24,緩解組為1.29±0.61,對(duì)照組為1.04±0.58。復(fù)發(fā)組患者血清中miR-126表達(dá)量低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；緩解組血清中miR-126的表達(dá)量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.003）；復(fù)發(fā)組血清中miR-126表達(dá)量較緩解組降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

7、＜0.001）。
　　4、復(fù)發(fā)組患者血清miR-200c表達(dá)量為2.26±0.75,緩解組為0.99±0.57,對(duì)照組為0.76±0.42。復(fù)發(fā)組 miR-200c表達(dá)量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.005）；緩解組miR-200c的表達(dá)量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；復(fù)發(fā)組miR-200c表達(dá)量較緩解組升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.062）。
　　5、MS患者血清miR-199a-5p與VE

8、GF的表達(dá)水平的相關(guān)關(guān)系在復(fù)發(fā)組和緩解組中均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r復(fù)發(fā)=-0.929,p復(fù)發(fā)=0.002；r緩解=-0.955，p緩解=0.000）。
　　6、MS患者血清miR-126與VEGF的表達(dá)水平的相關(guān)關(guān)系在復(fù)發(fā)組呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.601，p=0.001），在緩解組呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.893，p=0.000）。
　　7、MS患者血清miR-200c與VEGF的表達(dá)水平的相關(guān)關(guān)系在復(fù)發(fā)組和緩解組均呈正相關(guān)關(guān)系（r復(fù)

9、發(fā)=0.81，p復(fù)發(fā)=0.005；r緩解=0.843，p緩解=0.000）。
　　結(jié)論：
　　1、miR-199a-5p在MS患者血清中表達(dá)量下調(diào)。
　　2、miR-200c在MS患者血清中表達(dá)量上調(diào)。
　　3、miR-126在MS患者不同病程時(shí)期表達(dá)量不同，復(fù)發(fā)期表達(dá)下調(diào)、緩解期表達(dá)上調(diào)。
　　4、VEGF與MS的發(fā)病有關(guān)，VEGF水平愈高，MS愈趨向于復(fù)發(fā)。
　　5、VEGF水平升高受miR-19