PPARγ配體羅格列酮對(duì)人肝癌細(xì)胞系HepG2自噬的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、目的:觀察經(jīng)不同濃度PPARγ配體羅格列酮(RSG)誘導(dǎo)后人肝癌細(xì)胞系HepG2自噬水平的變化及自噬特異性抑制劑3-MA對(duì)羅格列酮誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞自噬的影響,并探討其作用機(jī)制。方法:體外培養(yǎng) HepG2細(xì)胞,將細(xì)胞分為對(duì)照組、不同濃度羅格列酮處理組(2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L)和3-MA抑制組。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)羅格列酮作用后HepG2細(xì)胞中自噬相關(guān)基因Beclin1的表達(dá)以及添加自噬抑制

2、劑3-MA后Beclin1的表達(dá)。透射電鏡觀察HepG2細(xì)胞自噬體的超微結(jié)構(gòu)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HepG2細(xì)胞增殖細(xì)胞相關(guān)核抗原Ki67的表達(dá)。結(jié)果:經(jīng)不同濃度羅格列酮作用后,HepG2細(xì)胞Beclin1蛋白的表達(dá)上調(diào)并呈劑量依賴關(guān)系,添加3-MA后可部分抑制羅格列酮的此種作用;透射電鏡下各組細(xì)胞內(nèi)均可見(jiàn)自噬體,但羅格列酮作用組的自噬體明顯增多;Ki67的表達(dá)隨藥物濃度的升高逐漸降低。結(jié)論:PPARγ配體羅格列酮可誘導(dǎo) HepG2細(xì)胞發(fā)生自