急性肺損傷新生大鼠肺上皮細(xì)胞內(nèi)鈣離子與肺表面活性蛋白A變化的研究.pdf

1、目的：本研究擬采用內(nèi)毒素(LPS)腹腔注射的方法復(fù)制新生大鼠急性肺損傷(ALI)模型,動(dòng)態(tài)觀察新生大鼠肺上皮細(xì)胞[Ca2+]i及血清、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中肺表面活性物質(zhì)蛋白A(SP-A)的變化趨勢(shì),以探討鈣超載、SP-A在ALI/ARDS發(fā)病機(jī)制中的作用,以及血清、BALF中SP-A的檢測(cè)在ALI/ARDS早期診斷中的價(jià)值。 方法：選擇6～7日齡的SD大鼠64只,隨機(jī)分為8組,其中肺損傷組(ALⅠ組)采用腹腔注射LPS

2、誘導(dǎo)建立ALI模型,按注射后0.5、1、2、4、8、16、24h等時(shí)間點(diǎn)分為7組,每組8只；對(duì)照組給予腹腔注射等量的生理鹽水,共8只。檢測(cè)對(duì)照組和ALI各組新生大鼠肺組織濕/干重比值(W/D比值),并觀察肺組織病理學(xué)改變。應(yīng)用熒光測(cè)定法檢測(cè)肺上皮細(xì)胞[Ca2+]i的水平,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清、BALF中的SP-A水平。 結(jié)果： 1.與對(duì)照組比較,ALI各組新生大鼠肺組織均可見(jiàn)不同程度的肺組織充血,注射

3、LPS 24h時(shí)可見(jiàn)斑片狀出血壞死灶。 2.ALⅠ組各時(shí)間點(diǎn)的病理切片順序出現(xiàn)由輕到重的肺間質(zhì)水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺泡出血等改變。 3.ALⅠ組的W/D比值在LPS注射后0.5h已明顯高于對(duì)照組(P<0.05),4h時(shí)達(dá)高峰,隨后有所下降。 4.ALⅠ組的肺上皮細(xì)胞[Ca2+]i隨著病程的進(jìn)展呈逐漸升高的趨勢(shì),2h時(shí)開(kāi)始[Ca2+]i己顯著高于對(duì)照組(P<0.05),至8h時(shí)達(dá)高峰,之后雖略有下降,但仍明顯高于對(duì)

4、照組(P<0.05)。 5.ALⅠ組血清SP-A水平在1 h已明顯高于對(duì)照組(P<0.05),8h時(shí)達(dá)高峰值,之后雖略有下降,但仍明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。 6.ALI各組BALF中的SP-A水平與對(duì)照組相比,有下降趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 1.新生大鼠注射LPS后,肺組織W/D比值升高,病理切片可見(jiàn)肺間質(zhì)水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺泡出血等,均符合ALI改變,說(shuō)明采用LPS復(fù)制AL