嗜肺軍團(tuán)菌dps調(diào)控基因的篩選及調(diào)控基因vacB的功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、嗜肺軍團(tuán)菌(Legionellapneumophila)是一種在水環(huán)境中普遍存在的革蘭氏陰性細(xì)菌，能夠在水中長期存活。在適當(dāng)?shù)臈l件下可以進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行胞內(nèi)增殖，對(duì)人體肺部的侵染能夠?qū)е乱环N名為“軍團(tuán)病”的非典型肺炎。在液體培養(yǎng)時(shí)，嗜肺軍團(tuán)菌進(jìn)入指數(shù)后期后會(huì)表現(xiàn)出對(duì)紫外線、熱激、滲透壓和饑餓等脅迫的抵抗性。Dps(DNA binding protein from starved cells)是一個(gè)在穩(wěn)定期大量表達(dá)的蛋白，能夠非特異性的

2、與DNA結(jié)合，保護(hù)DNA免受氧化脅迫和紫外線等外界因子的傷害。 本論文采用GFP表達(dá)的綠色熒光作為表型，通過轉(zhuǎn)座子插入突變篩選dps的上游調(diào)控因子，一共獲得7個(gè)候選突變株。通過測序確定轉(zhuǎn)座子的插入位點(diǎn)，選定其中的’vacB進(jìn)行深入研究。 通過非極性缺失技術(shù)將野生型菌株LpO2的vacB基因敲除，構(gòu)建vacB功能缺失的突變株MGO2，研究野生菌株和vacB突變株的生理生化特征。結(jié)果表明vacB缺失并不影響菌株的生長，突變株

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