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1、南開大學碩士學位論文嗜肺軍團菌O血清型分子分型檢測基因芯片的建立姓名:姚芳芳申請學位級別:碩士專業(yè):微生物學指導教師:曹勃陽201205AbstractAbstractLegionellaisthemainpathogenthatcouldcauseLegionnaires’disease(LD)andPontiacfeverinhuman,andatpresent,manycountriesandregionshavereported
2、LegionellainfectioncasesLegionellaisonetypeofGramnegativepathogenicbacteriaThemajorityofinfectionsarecausedbystrainsbelongingtoLegionellapneumophila,whichhas15serogroupsandwidelyexistsinnature,especiallyinthewaterandCanb
3、etakenbysomefreelifeamoebaTheLegionellaoftencausepneumoniaandacuteinfectionofrespiratorytractInrecentyears,ashumanlifelevelincreases,theapplicationoflargepublicfacilities,allkindsofdrainagepipe,airconditioningandcoolingt
4、owers,haveraisedthepossibilityofcontaminationofLegionellaInordertofurthercontroltheproblem,itisparticularlyimportanttoestablishalleffective,rapidlydetectionandidentificationmethod111isstudyaimstodevelopanexperimentalproc
5、edureusingtheoligonucletidemicroarraytechnologyatserogrouplevelbydetectingtwelveserogroupsofLegionellapneumophilaincluding01,02,03,04,05,06,07,010,01,,012、013and01516SrDNAwaschosenaspositivecontrolfortheprimerandprobedes
6、ignThegenesofwztwzmandwecAofOantigengeneclusterhavebeenselectedasspecificmolecularmarkersandaDNAmicroarrayhasbeenestablishedtodetectLegionellapneumophilaatscrogrouplevelBasedontheabovementionedspecificgenes,theserogroups
7、pecificprimersandprobesweredesignedAfterrepeatedlyconservativeandspecificscreeningtests,10specificprimerpairsandtotal28probeswerefinallyselected,including25probesforspecificgenes,onepositivecontrol,onenegativecontrolando
8、neforpositionalreferenceandprintingcontr01AfterthemicroarrayWasfabricated,PCRamplification,labelinghybridizationtemperature,andhybridizationtimewereoptimizedintheprocessofexperimentsFinallythespecificityrepeatability,and
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