烏司他丁治療大鼠海水淹溺型急性肺損傷的實驗觀察.pdf

1、研究背景：
　　海水淹溺型急性肺損傷（seawater drowning induced acute lung injury，SD-ALI）是海上作業(yè)人員溺海死亡的主要原因，其主要病理生理學特點為低氧血癥、高碳酸血癥和代謝性酸中毒。目前研究認為SD-ALI的發(fā)病機制可能為海水對肺組織的直接損傷作用及海水淹溺后機體炎癥反應的過度表達，其中多形核中性粒細胞（polymorphonuclear neutrophil,PMN）及細胞因子起

2、著重要作用。多項臨床及實驗研究表明烏斯他丁對非心源性肺水腫有治療作用，其作用機制可能為抑制PMN在炎癥區(qū)域聚集及激活，調(diào)節(jié)細胞因子的釋放。本實驗通過建立大鼠SD-ALI動物模型，分析PMN和細胞因子變化情況初步探討SD-ALI的發(fā)病機制，并通過觀察烏斯他丁治療后大鼠肺組織勻漿中髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性的變化及支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中細胞因子

3、含量的變化，探討烏斯他丁對SD-ALI的治療作用及治療機制。
　　目的：
　　1.建立大鼠SD-ALI動物模型。
　　2.觀察SD-ALI大鼠BALF中細胞因子含量變化及肺組織勻漿中MPO活性變化，初步探討SD-ALI發(fā)病機制。
　　3.觀察烏司他丁對SD-ALI的治療作用并探討其作用機制。
　　方法：
　　1.建立大鼠SD-ALI動物模型。選用22只健康雄性SD大鼠為實驗對象，檢測海水灌注前大鼠呼吸

4、頻率及動脈血氧分壓。3min內(nèi)，勻速向大鼠氣管內(nèi)注入海水4ml/kg,繼續(xù)觀察大鼠呼吸頻率變化，并檢測海水灌注后30min、60min時動脈血氧分壓。海水灌注后60min，留取動脈血后放血處死大鼠，取肺組織，觀察病理變化。
　　2.30只健康雄性SD大鼠隨機分為對照組、模型組和治療組，每組10只。其中模型組和治療組大鼠氣管內(nèi)注入4mL/kg人工海水建立SD-ALI動物模型。治療組建模成功后腹腔注入烏司他丁10萬U/kg。于實驗0h

5、、0.5h、4h檢測各組大鼠動脈血氧分壓。實驗4h處死大鼠并留取標本檢測肺濕干重比值（wet/dry weight，W/D），檢測支氣管肺泡灌洗液（BALF）中腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白介素-10（interleukin-10，IL-10）、白介素-1β（Interleukin-1beta，IL-1β）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）含量，檢測肺組織勻漿

6、中MPO活性，觀察肺組織病理變化。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠海水淹溺后呼吸頻率增快，口鼻紫紺，雙肺布滿粗濕啰音，淹溺后30min、60min動脈血氧分壓、氧合指數(shù)明顯下降，且兩個時間點動脈血氧分壓、氧合指數(shù)結(jié)果及實驗結(jié)束后大鼠肺組織病理改變均符合急性肺損傷(acutelung injury,ALI)診斷標準。
　　2.海水淹溺后0.5h大鼠動脈血氧分壓明顯下降；淹溺后4h，治療組大鼠血氧分壓明顯提升（P<0.05）。模

7、型組、治療組大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6含量，肺組織勻漿中MPO活性，W/D均高于對照組（P<0.05），兩組之間比較，模型組較低；模型組、治療組BALF中IL-10含量明顯高于對照組（P<0.05），兩組之間比較，治療組BALF中IL-10含量明顯高于模型組（P<0.05）。模型組大鼠肺組織病理觀察可見肺泡壁破裂、肺間質(zhì)及肺泡水腫、出血、微血栓形成、局限性肺不張、代償性肺氣腫、炎癥細胞浸潤。治療組大鼠肺泡壁完整性的破