Fkbp11轉(zhuǎn)基因小鼠的建立.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、Fkbpll是用基因芯片對(duì)小鼠肝細(xì)胞癌組織中差異表達(dá)基因進(jìn)行篩選過程中獲得的一個(gè)功能未知基因，屬于Fk506結(jié)合蛋白家族成員，具有一個(gè)保守的肽基輔氨酸異構(gòu)酶(peptidyl-prolyl cis/trans。isomerases，PPIase)結(jié)構(gòu)域，主要在腺體組織中高表達(dá)，前期的體外實(shí)驗(yàn)提示Fkbpll可能通過影響細(xì)胞周期參與腫瘤的發(fā)生過程。 為在體內(nèi)研究Fkbpll的生物學(xué)功能，本實(shí)驗(yàn)以pIRES2-EGFP質(zhì)粒為骨架載體

2、，構(gòu)建了一個(gè)由CMV啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)的Fkbpll真核表達(dá)載體，通過雄原核顯微注射的方法建立了該基因的轉(zhuǎn)基因小鼠。用PCR和Southern雜交的方法共檢測(cè)出2只陽性轉(zhuǎn)基因小鼠。用Northern雜交、Western印記和熒光顯微鏡觀察進(jìn)行檢測(cè)，其中一只首建者小鼠P803的子代表達(dá)譜穩(wěn)定，F(xiàn)kbpll基因表達(dá)于小鼠的胰腺、胃臟、心臟和腎臟組織，其中，胰腺組織的腺泡表達(dá)水平最高。表型分析顯示Fkbpll轉(zhuǎn)基因小鼠在胰腺、胃臟和腎臟有不同程度

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