多壁納米碳圈對大鼠血小板功能及凝血指標(biāo)的影響.pdf

1、目的：
　　 納米材料具有強(qiáng)烈的體積效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng),被日益廣泛地用于電子行業(yè),造紙業(yè)、紡織品原料、能源、化妝品等各個領(lǐng)域。在納米科技帶來輕便、經(jīng)久耐用的納米工具,清潔且廉價的能源以及智能的生物醫(yī)藥產(chǎn)品的同時[1],從事納米材料研究、生產(chǎn)、消費以及相關(guān)納米材料廢物處理的人數(shù)將與日俱增,相關(guān)職業(yè)暴露于納米材料的機(jī)會越來越多[2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)不同途徑接觸的納米材料都可以進(jìn)入血液循環(huán),可能對血小板及凝

2、血功能產(chǎn)生影響[3,4],因此對于納米材料潛在毒性的研究日益受到重視,其中對血液系統(tǒng)的影響也深受關(guān)注[5,6]。
　　 本課題研究的多壁納米碳圈(MWCNOs)被廣泛應(yīng)用于太陽能電池、場發(fā)射、光限幅以及燃料電池電極等領(lǐng)域[7-9],具有良好的生物相容性,在生物醫(yī)學(xué)方面具有廣闊的應(yīng)用前景[7]。鑒于納米材料可由多種途徑進(jìn)入血液循環(huán),而MWCNOs對血液循環(huán)系統(tǒng)的生物安全性并不清楚。因此,本實驗采用體外實驗探索MWCNOs對大鼠血小

3、板聚集、血小板粘附功能的影響,并從體內(nèi)水平觀察了MWCNOs對大鼠血小板聚集、出血時間、凝血指標(biāo)以及對血栓形成的影響,以期為其在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用提供參考。
　　 方法:
　　 1.MWCNOs對血小板聚集、粘附、頸動脈血栓形成的影響用比濁法觀察不同濃度MWCNOs對由刺激劑ADP、Thrombin、Collagen引起的血小板聚集率的影響,設(shè)定本實驗的濃度范圍。用倒置熒光顯微鏡觀察20μg/ml MWCNOs,在不同剪切

4、力(500 s-1、1000 s-1)下對血小板粘附與膠原的影響。用化學(xué)刺激法,觀察2 mg/kg MWCNOs對25％三氯化鐵誘導(dǎo)大鼠頸動脈血栓形成中的血流變化及其單位長度血栓濕重的影響。
　　 2.多壁納米碳圈對出血時間、凝血指標(biāo)的影響尾靜脈注射不同劑量MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg)12 h,用斷尾法觀測大鼠出血時間。全自動血液凝固儀檢測體內(nèi)注射MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8

5、 mg/kg)對大鼠活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)及凝血酶時間(TT)的影響。
　　 3.實驗結(jié)果用SPSS軟件統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果
　　 1.MWCNOs對血小板聚集、粘附、頸動脈血栓形成的影響在不同刺激劑,二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、膠(collagen,COLL)、凝血酶(thrombin,THR)誘導(dǎo)下,隨著MWCNOs(0.2、2、20μg

6、/ml)濃度的升高,血小板聚集率降低,各刺激劑組中的高劑量組(20μg/ml)血小板聚集率與其溶劑組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;體內(nèi)注射不同劑量的MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8mg/kg)12 h,觀察由10μ MADP誘導(dǎo)下MWCNOs對血小板聚集率的影響,各劑量組的血小板聚集率(51.2％±4.5％、54.3％±7.8％和56.8％±3.0％)均低于溶劑組(64.3％±3.4％),但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 在

7、低剪切力(500 s-1)作用下,20μg/ml MWCNOs抑制血小板粘附于膠原;而隨著剪切力升高(1000 s-1),抑制作用消失。
　　 不同劑量的MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg)對大鼠頸動脈血栓形成中的血流及單位長度血栓濕重與溶劑組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.多壁納米碳圈對出血時間、凝血指標(biāo)的影響尾靜脈注射不同濃度MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg)