苯并芘對血小板功能和血栓形成的影響.pdf

1、多環(huán)芳烴(polyeyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是含有兩個或兩個以上苯環(huán)的芳香族化合物。該類化合物性質(zhì)穩(wěn)定,污染持久,分布廣泛。苯并芘(benzo(a)pyrene,BaP)是多環(huán)芳烴的代表物質(zhì),存在于汽車尾氣、煤、石油、香煙等的不完全燃燒產(chǎn)物中,不適當(dāng)?shù)呐腼兎绞揭矔a(chǎn)生苯并芘。由于其分布廣、致癌性強,已引起普遍關(guān)注。
　　 BaP致癌毒性在過去幾年中有了深入的研究。BaP可經(jīng)過生物體代謝,

2、最終降解為二氫環(huán)氧苯并芘(benzo(a)pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide,BPDE)。BaP作為強致癌物,可與DNA結(jié)合,引起DNA損傷,基因突變,誘發(fā)癌癥。BaP進入機體后,對神經(jīng)及免疫系統(tǒng)均有影響。此外,早期的研究顯示BaP能弓l起血栓,對心血管系統(tǒng)也有影響。盡管動物模型和流行病學(xué)研究都表明BaP能促進動脈粥樣硬化,但確切的機制仍不清楚。
　　 血小板是血液中的有效成分之一,除正常的止血等生理功能外

3、,在血栓形成中也起著重要作用。我們期望通過檢測BaP對血小板功能及血栓形成的影響,探討B(tài)aP致心血管疾病的機制。
　　 首先,用血小板聚集儀檢測了BaP對血小板聚集的影響。通過聚集實驗,我們發(fā)現(xiàn)10μmol/L,1μmol/L和0.1μmol/L BaP本身均不能引起血小板聚集。根據(jù)文獻中細胞實驗的濃度和我們的實驗結(jié)果,確定10μmol/L為BaP的工作濃度。我們用濃度為10μmol/L的BaP孵育血小板,并分別用ADP、膠原和

4、凝血酶刺激血小板。結(jié)果顯示BaP孵育不能增強在膠原和凝血酶的刺激下的血小板聚集。但是,BaP孵育的血小板在ADP的刺激下,聚集率達到0.80±0.10,與未經(jīng)BaP孵育的血小板相比有極顯著差異(P＜0.01)。
　　 其次,我們采用流動小室系統(tǒng)觀察BaP對血小板粘附的影響。流動小室系統(tǒng)是一套由流動小室、靜脈泵、醫(yī)用硅膠管道和熒光顯微鏡構(gòu)建的血液循環(huán)模型,能夠很好的模擬剪切力作用下的血液狀態(tài),研究血小板粘附。我們研究了剪切率為10

5、00s-1時,BaP對血小板粘附的影響。與溶劑對照相比,經(jīng)BaP孵育的血小板的粘附顯著增強(P＜0.01)。
　　 流式細胞術(shù)以速度快、靈敏度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點在血液研究中有著廣泛的運用。由于P-選擇素是反映血小板活化狀態(tài)的重要指標(biāo),因此本研究中我們用流式細胞儀檢測BaP對血小板P-選擇素表達的影響。結(jié)果顯示BaP孵育后的血小板P-選擇素能在ADP誘導(dǎo)下表達增強(P＜0.01),而BaP孵育后的血小板P-選擇素不能在凝血酶誘導(dǎo)下

6、表達增強。
　　 動物血栓模型能夠模擬人體疾病,有助于更好的評價藥物和研究疾病機制。我們建立了FeCl3誘導(dǎo)小鼠頸動脈血栓模型,腹腔注射苯并芘10 mg/kg,觀察BaP對小鼠血栓形成時間的影響。結(jié)果顯示注射BaP的小鼠頸動脈血栓形成時間短于對照組,暗示了BaP對體內(nèi)血栓形成有促進作用。
　　 通過上述研究,我們得到以下結(jié)論:BaP可促進體內(nèi)血栓形成,引起血小板聚集、粘附和活化。BaP對血小板的影響可能是通過ADP介導(dǎo)的