小麥光周期相關(guān)基因TaPRR的克隆和鑒定.pdf

1、小麥抽穗期是植物育種相關(guān)的重要農(nóng)藝性狀之一。大量研究表明，光周期反應(yīng)是影響抽穗期的重要因素。為了探討小麥光周期相關(guān)基因與抽穗期的關(guān)系，本研究分析了小麥光周期相關(guān)基因TaPRR與小麥抽穗期性狀的連鎖關(guān)系，并且對(duì)TaPRR進(jìn)行了分離克隆、定位以及表達(dá)分析，主要研究結(jié)果如下： 1) 采用電子克隆結(jié)合RT-PCR的方法，分離克隆得到與大麥Ppd-H1具有較高氨基酸相似性的小麥光周期相關(guān)基因TaPRR1基因片段。進(jìn)一步利用3338和Alt

2、gold重組近交系群體將此片段定位到2D染色體短臂上；QTLMapper V 1.60的區(qū)間分析法連鎖分析結(jié)果表明，TaPRR1所在區(qū)域可以解釋抽穗期性狀變異的39.27％。 2) 采用BD GenomeWalker與電子克隆相結(jié)合的方法，獲得了小麥品系227中TaPRR基因完整編碼區(qū)的基因組序列，基因組結(jié)構(gòu)分析表明，該基因由8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子組成。 3) 為了分離克隆更多小麥TaPRR基因家族成員，本研究設(shè)計(jì)4對(duì)基

3、因特異性引物進(jìn)行小麥品系3338和Altgold基因組以及cDNA的擴(kuò)增，并將擴(kuò)增序列進(jìn)行拼接，結(jié)果發(fā)現(xiàn)從3338中得到3條基因組序列，4條cDNA序列(其中3條具有完整的ORF結(jié)構(gòu))；在Altgoldq中獲得6條基因組序列。序列分析表明，這些序列之間存在多處插入/缺失差異，但在Pseudo-receiver以及CCT保守區(qū)域差異很小。 4) 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)小麥TaPRR基因的晝夜表達(dá)變化進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)333