擬南芥Atmap18基因啟動(dòng)子的分析.pdf_第1頁(yè)
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1、Atmap18(At5944610)是從擬南芥基因組中分離得到的一個(gè)基因，其開(kāi)放閱讀框編碼168個(gè)氨基酸，有8個(gè)類(lèi)似MAP18微管結(jié)合域的WEKKN/EE不完全特征重復(fù)序列，推測(cè)其為一個(gè)微管結(jié)合蛋白。為了研究AtMAP18的基因表達(dá)模式，分組織提取了哥倫比亞野生型擬南芥的總RNA，Northern blot雜交結(jié)果顯示：AtMAP18主要在根和花中表達(dá)。 用生物信息學(xué)網(wǎng)站植物順式作用元件數(shù)據(jù)庫(kù)PLACE數(shù)據(jù)庫(kù)分析啟動(dòng)子元件，根據(jù)

2、元件的分布，初步將其劃分為5個(gè)區(qū)段，設(shè)計(jì)四對(duì)引物(加有BamHI、HindⅢ酶切位點(diǎn))，構(gòu)建了四個(gè)不同長(zhǎng)度的片段(1697bp、1176bp、805bp和401bp)與報(bào)告基因GUS連接的植物表達(dá)載體，分別命名為oBI1697G、pBI1176G、pBI805G和pBI401G。用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花序轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化擬南芥，提取轉(zhuǎn)化后植株的基因組DNA，PCR(GUS基因的擴(kuò)增)、點(diǎn)雜交證明外源基因穩(wěn)定整合到擬南芥的基因組中。GUS組織化學(xué)染色分

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