外磁場作用下SPIO標(biāo)記脂肪干細(xì)胞經(jīng)尾靜脈移植治療急性腦缺血.pdf

1、目的: 觀察外置磁場能否提高超順磁性氧化鐵(superparamagneticiron oxide，SPIO)標(biāo)記的脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)經(jīng)尾靜脈移植治療SD大鼠急性腦缺血的成功率。
　　方法: 分離并培養(yǎng)SD大鼠脂肪干細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測其免疫表型，SPIO標(biāo)記脂肪干細(xì)胞，普魯士藍(lán)染色觀察其標(biāo)記率，分別用CCK-8法及臺盼藍(lán)染色法檢測細(xì)胞不同條件下分裂增殖能力及細(xì)胞活性，標(biāo)

2、記細(xì)胞接種24小時后觀察細(xì)胞聚集情況，Transwell試驗驗證標(biāo)記細(xì)胞在外加磁場作用下是否可以定向遷移。線栓法制備大鼠大腦中動脈栓塞(MCAo)模型，隨機(jī)分成未標(biāo)記ADSCs靜脈移植組(IC組)，SPIO標(biāo)記ADSCs靜脈移植組(ICS組)和SPIO標(biāo)記ADSCs靜脈移植并外加磁場組（ICSM組），共3組，各組在細(xì)胞移植后1天，7天分別進(jìn)行神經(jīng)損傷嚴(yán)重程度評分(NSS)，普魯士藍(lán)染色觀察SPIO標(biāo)記ADSCs在大腦內(nèi)的分布情況，TTC

3、染色比較缺血體積，原子吸收光譜儀測各組大腦鐵含量。
　　結(jié)果: ADSCs不表達(dá)CD45表達(dá)CD29、CD54。SPIO標(biāo)記脂肪干細(xì)胞陽性率接近100％。外磁場對細(xì)胞的增殖能力及活性均無負(fù)面影響(P＞0.05)。接種24小時后觀察，標(biāo)記細(xì)胞向磁鐵區(qū)聚集，距磁鐵越近細(xì)胞數(shù)越多(P＜0.01)。Transwell試驗中磁場組細(xì)胞跨膜細(xì)胞數(shù)顯著高于對照組和空白對照組(P＜0.01)，而對照組和空白對照組跨膜細(xì)胞數(shù)比較差異無顯著性意義(