玉米籽粒特異表達大豆鐵蛋白Ferritin基因遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、鐵是人體生理代謝過程中不可缺少的必需營養(yǎng)元素之一。然而，由于飲食中鐵含量水平低或鐵的生物有效性低等原因，造成人體鐵營養(yǎng)素缺乏，嚴(yán)重影響人體的生理和心理機能。鐵蛋白(Ferritin)是一種廣泛存在于生物體中的可以貯存鐵離子的貯藏蛋白，調(diào)控鐵元素的吸收和釋放。玉米(Zea mays L.)的種植面積在我國居第一位，是主要的糧食、飼料作物之一，其種子中三倍體胚乳占其籽?？傊亓康?0％-85％，是主要的食用部位。本研究使用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化

2、方法將重組載體pCUB-Zein∷Ferritin導(dǎo)入玉米，期望在玉米胚乳特異表達基因15kDβ-Zein啟動子的調(diào)控下，使大豆鐵蛋白Ferritin基因玉米玉米籽粒中特異表達，提高籽粒鐵含量，為改良玉米營養(yǎng)品質(zhì)，解決以玉米為主食人群的缺鐵問題提供幫助。
　　主要結(jié)果如下:
　　1.分離Zein∷Ferritin片段，基于pCUB植物表達載體構(gòu)建pCUB-Zein∷ Ferritin，并通過菌液PCR、質(zhì)粒PCR、酶切及測序

3、等方法加以驗證。
　　2.采用凍融法將植物表達載體pCUB-Zein∷ Ferritin轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌菌株LBA4404，經(jīng)農(nóng)桿菌菌液PCR檢測，表明表達載體已成功導(dǎo)入農(nóng)桿菌LBA4404。
　　3.農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化玉米自交系齊319和鄭58的莖尖，對除草劑（草銨磷）抗性植株的基因組DNA進行PCR檢測，轉(zhuǎn)化率分別為3.6％和0。
　　4.從20個受體材料為齊319的T0代陽性株系中選取1000粒種子，僅有672粒種子發(fā)芽