姜黃素對(duì)運(yùn)輸應(yīng)激狀態(tài)下生長(zhǎng)豬海馬NO-NOS系統(tǒng)的影響.pdf

1、研究表明，應(yīng)激能夠引起海馬功能紊亂，從而導(dǎo)致海馬神經(jīng)元死亡，最終引起各種神經(jīng)退行性疾病。脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、海人酸（kainic acid，KA）引起的海馬神經(jīng)元急性應(yīng)激損傷與N0/NOS系統(tǒng)的活化有關(guān)。嚙齒動(dòng)物上的研究表明，姜黃素（curcumin，CUR）能夠緩解動(dòng)物的慢性應(yīng)激，也可以通過(guò)調(diào)節(jié)海馬中NO的合成緩解LPS或KA引起的海馬神經(jīng)元損傷。豬的短途運(yùn)輸是一種亞急性應(yīng)激，這種應(yīng)激是否可能導(dǎo)致海

2、馬NO-NOS系統(tǒng)活性發(fā)生改變，而CUR是否可能通過(guò)調(diào)節(jié)海馬。NO-NOS系統(tǒng)緩解豬的運(yùn)輸應(yīng)激尚不清楚。因此，本試驗(yàn)旨在研究：（1）2h運(yùn)輸是否導(dǎo)致豬海馬NO-NOS系統(tǒng)活性的變化；（2）運(yùn)輸前飼喂姜黃素21天是否能夠逆轉(zhuǎn)或緩解運(yùn)輸應(yīng)激狀態(tài)下豬海馬NO-NOS系統(tǒng)功能的變化；（3）通過(guò)豬原代海馬神經(jīng)元培養(yǎng)，分析CUR是否對(duì)神經(jīng)元NO-NOs系統(tǒng)具有直接作用。
　　 1飼喂CUR對(duì)運(yùn)輸應(yīng)激狀態(tài)下豬海馬NO-NOS系統(tǒng)的影響

3、　　 采用18頭皮特蘭×二花臉F2代雄性仔豬，斷奶后隨機(jī)分成三組：對(duì)照組（CON）（飼喂21 d基礎(chǔ)日糧）、運(yùn)輸對(duì)照組（T-CON）（飼喂21 d的基礎(chǔ)日糧，然后進(jìn)行2 h運(yùn)輸）以及飼喂CUR組（CUR）（連續(xù)21 d每天口服8 mg/kg.BW姜黃素，然后與T-CON組同時(shí)進(jìn)行2 h的運(yùn)輸）。運(yùn)輸結(jié)束后，用電擊的方法將豬致昏，迅速采集血液、海馬樣本。測(cè)定不同處理組血漿皮質(zhì)醇水平及海馬NO-NOS系統(tǒng)的變化。結(jié)果顯示：2 h的運(yùn)輸極顯

4、著增加血漿皮質(zhì)醇的水平（P<0.01）；CUR能夠明顯緩解運(yùn)輸應(yīng)激導(dǎo)致的血漿皮質(zhì)醇極顯著升高（P<0.05）。2 h的運(yùn)輸引起海馬NO含量顯著增加（P<0.05），海馬神經(jīng)型一氧化氮合酶（nNOS）mRNA與內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）mRNA表達(dá)顯著上調(diào)（P<0.05），總一氧化氮合酶（T-NOS）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）活力和結(jié)構(gòu)型一氧化氮合酶（eNOS）活力顯著增加（P<0.05）；CUR完全逆轉(zhuǎn)了運(yùn)輸應(yīng)激導(dǎo)致的NO合成

5、增加和cNOS活力的顯著上調(diào)（P<0.05），緩解了由應(yīng)激導(dǎo)致的nNOS、eNOS mRNA表達(dá)和T-NOS活力的顯著上調(diào)。這些結(jié)果表明：CUR可逆轉(zhuǎn)或緩解運(yùn)輸應(yīng)激導(dǎo)致的豬海馬NO/NOS系統(tǒng)活化。
　　 2姜黃素預(yù)處理對(duì)基礎(chǔ)和應(yīng)激狀態(tài)下豬海馬神經(jīng)元活力和NO-NOS系統(tǒng)的影響
　　 采用豬原代海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)，研究CUR預(yù)處理對(duì)地塞米松（DEX）引起的神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用，并觀察NO-NOS系統(tǒng)是否參與CUR的作用。

6、通過(guò)MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力；采用NO檢測(cè)試劑盒與NOS檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞上清NO含量和細(xì)胞中NOS活力。結(jié)果顯示，DEX處理24h顯著降低神經(jīng)元活力（P<0.05），但是10μM CUR預(yù)處理24 h顯著逆轉(zhuǎn)了DEX導(dǎo)致的細(xì)胞活力下降（P<0.05）。10μM DEX處理神經(jīng)元24 h后，神經(jīng)元NO水平顯著升高（P<0.05），T-NOS、iNOS和cNOS活力顯著升高（P<0.05）；CUR預(yù)處理顯著降低了DEX誘導(dǎo)的NO水平升高（P<