NGR修飾的富勒烯2-甲氧基雌二醇腫瘤靶向給藥系統(tǒng)的構(gòu)建及光療活性的研究.pdf

1、富勒烯(C60)具有光動(dòng)力學(xué)治療作用，可作為潛在的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)載體，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景，但其高疏水性極大地限制了其在生物系統(tǒng)中的應(yīng)用。本課題的目的是通過對富勒烯進(jìn)行化學(xué)修飾解決其水溶性問題，并連接腫瘤血管靶向肽NGR，荷載抗腫瘤藥物2-甲氧基雌二醇(2ME)，構(gòu)建一個(gè)新型的腫瘤靶向給藥系統(tǒng)DMA-C60-2ME-NGR?？疾煸撃[瘤靶向給藥系統(tǒng)光療和化療的協(xié)同抗腫瘤活性。
　　 首先利用Bingle環(huán)加成反應(yīng)和酯水解反應(yīng)合

2、成了富勒烯水溶性衍生物二取代C60丙二酸衍生物(DMA-C60)，然后通過二硬脂酸磷脂酰胺-聚乙二醇2000-馬來酰亞胺(DPM)復(fù)合物中的二硬脂酸磷脂酰胺端的分散效應(yīng)將其與DMA-C60連接在一起，腫瘤靶向基團(tuán)NGR再與該復(fù)合物中馬來酰亞胺端的巰基發(fā)生加成反應(yīng)而連接到DMA-C60上，從而制備出腫瘤靶向載體系統(tǒng)DMA-C60-NGR。采用傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)、薄層硅膠色譜(TLC)、原子力顯微鏡(AFM)、激光納米粒度分析

3、儀(DLS)等對該腫瘤靶向載體系統(tǒng)進(jìn)行表征，結(jié)果表明該腫瘤靶向載體系統(tǒng)在PBS溶液、培養(yǎng)基和胎牛血清中均具有良好的穩(wěn)定性和均勻的粒徑分布，能夠作為潛在的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)載體應(yīng)用于生物系統(tǒng)中。
　　 通過單因素實(shí)驗(yàn)考察了載體材料與2ME的投料比、超聲時(shí)間、探超功率及次數(shù)等因素對腫瘤靶向制劑載藥量的影響，對擬構(gòu)建的腫瘤靶向給藥系統(tǒng)DMA-C60-2ME-NGR的處方進(jìn)行優(yōu)化，確定了其最佳制備條件。采用原子力顯微鏡(AFM)、激光納米粒度分析

4、儀(DLS)等對該腫瘤靶向給藥系統(tǒng)的性質(zhì)進(jìn)行了考察，結(jié)果表明該腫瘤靶向給藥系統(tǒng)能夠高效負(fù)載抗腫瘤藥物2ME，載藥機(jī)制不僅僅是依靠簡單的物理吸附作用，可能與2ME和載體間形成氫鍵有關(guān);該腫瘤靶向給藥系統(tǒng)在生理鹽水、PBS、培養(yǎng)基和胎牛血清中穩(wěn)定性良好，粒徑電位分布均勻，能夠作為體內(nèi)腫瘤靶向給藥系統(tǒng)應(yīng)用，具有潛在的研究意義。
　　 選用人乳腺癌MCF-7細(xì)胞作為研究對象，對所構(gòu)建的腫瘤靶向給藥系統(tǒng)的光動(dòng)力學(xué)治療和化學(xué)治療協(xié)同增強(qiáng)的體

5、外抗腫瘤活性進(jìn)行了研究。SRB實(shí)驗(yàn)表明載體系統(tǒng)DMA-C60-NGR對MCF-7細(xì)胞幾乎沒有毒性，但在光照條件下能產(chǎn)生毒性作用;腫瘤靶向給藥系統(tǒng)DMA-C60-2ME-NGR對MCF-7細(xì)胞具有明顯的抑制增殖作用，且在光照條件下抑制作用最強(qiáng)，表明該腫瘤靶向給藥系統(tǒng)由DMA-C60-NGR介導(dǎo)的光動(dòng)力學(xué)治療和2ME的化學(xué)治療具有明顯的協(xié)同增強(qiáng)作用。本研究還證明了DMA-C60-NGR在光照條件下引起細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧以及造成DNA損傷，從而