中國(guó)部分省區(qū)豬瘟E0基因的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、豬瘟(Swine Fever，SF)是危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的惡傳染病。近幾年，由于養(yǎng)殖管理模式的變化，豬肉產(chǎn)品的流通，導(dǎo)致了豬瘟的流行情況更為復(fù)雜。利用分子生物學(xué)技術(shù)可以快捷迅速地應(yīng)對(duì)豬瘟的急檢任務(wù)，同時(shí)可以對(duì)流行毒株的基因序列進(jìn)行分析，了解豬瘟流行毒株的變異情況。E0蛋白是豬瘟病毒重要的囊膜糖蛋白之一，改變或缺失E0上His297、His346，2個(gè)位置上的組氨酸會(huì)導(dǎo)致豬瘟病毒毒力減弱，甚至病毒復(fù)制受阻，表明E0與CSFV致病力有關(guān)。所以本

2、研究根據(jù)GenBank上發(fā)表的CSFV Shimen株基因序列選擇保守區(qū)域合成了2對(duì)引物EODF/EODR EOEF/EOER，采用套式PCR擴(kuò)增E0全基因，對(duì)我國(guó)10個(gè)省、自治區(qū)送檢的病料進(jìn)行了檢測(cè)并開展了對(duì)豬瘟E0基因分子流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果如下： 1.本研究由GenBank上發(fā)表的CSFV Shimen株基因序列，合成了2對(duì)引物EODF/EODR和EOEF/EOER，并對(duì)這兩對(duì)引物的特異性和靈敏度進(jìn)行檢測(cè)。用套式PCR方法對(duì)

3、10個(gè)省、自治區(qū)送檢的淋巴結(jié)、脾臟和扁桃體材料進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果證明這兩對(duì)引物適用于豬瘟病毒的檢測(cè)工作。 2.本研究使用套式PCR檢測(cè)方法，對(duì)我國(guó)10個(gè)省、自治區(qū)送檢的1600多份樣本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果統(tǒng)計(jì)，豬瘟陽性檢出率2005年間約為26％，2006年間為39％。 3.各省區(qū)的豬瘟流行毒株間E0基因的核酸變異在0.0％～18.0％之間，豬瘟流行毒株與參考毒株HCLV間的核酸變異在1.0％～17％之間；各省區(qū)豬瘟流行毒株間E0

4、片段的氨基酸變異在0.0％～19.0％之間，豬瘟流行毒株與參考毒株HCLV間氨基酸變異在0.4％～18％之間。CSFV流行毒株中，HEN74、LNl63、HEB30、AH44ZJ87、ZJ47、ZJ94、ZJ69、HUN84、SD89、AH76、ZJ73、FJ216、AH24與我國(guó)的主要參考毒株Shimen、HCLV、CHVRI毒株屬于基因1群，其余毒株都屬于基因2群，說明我國(guó)大部分省區(qū)以基因2群豬瘟毒株為優(yōu)勢(shì)流行毒株。對(duì)HCLV毒株的