己酮可可堿對(duì)體外培養(yǎng)的眶成纖維細(xì)胞增殖和透明質(zhì)酸合成的影響.pdf

1、　　目的：　　體外培養(yǎng)人眼眶成纖維細(xì)胞，以培養(yǎng)的眶成纖維細(xì)胞為研究對(duì)象，觀察己酮可可堿(PTX)對(duì)眶成纖維細(xì)胞增殖及分泌透明質(zhì)酸(HA)的作用。 方法：　　1.組織塊法培養(yǎng)人眶成纖維細(xì)胞，觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況及特性、HE染色了解其形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，免疫組化染色鑒定細(xì)胞來(lái)源?！　?.將培養(yǎng)的細(xì)胞以1×103/孔接種于細(xì)胞培養(yǎng)板中，10％胎牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)48h，無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24h后，隨機(jī)分組，設(shè)空白對(duì)照組及不同濃度(0.001

2、、0.01、0.1、0.5、1mg/ml)PTX組，每組6個(gè)復(fù)孔。分別作用24、48、72小時(shí)后，觀察細(xì)胞形態(tài)的變化，應(yīng)用MTT比色法、放射免疫分析法觀察不同濃度PTX對(duì)眶成纖維細(xì)胞增殖及分泌透明質(zhì)酸的作用。 結(jié)論：　　1.本實(shí)驗(yàn)成功培養(yǎng)出眶成纖維細(xì)胞。細(xì)胞傳代穩(wěn)定，為甲狀腺相關(guān)眼病的研究提供了實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。　?.己酮可可堿可以抑制眶成纖維細(xì)胞的增殖及透明質(zhì)酸的分泌，并且具有劑量依賴(lài)性和時(shí)間依賴(lài)性，為己酮可可堿的臨床應(yīng)用提供了