中國乳腺癌高危人群BRCA1-BRCA2基因的胚系突變研究.pdf

1、背景與目的: 乳腺癌已成為中國女性最常見的惡性腫瘤，嚴重威脅中國女性的生命與健康。早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療是降低腫瘤死亡率的最重要手段。乳腺癌是遺傳背景最強的腫瘤之一，通過檢測易感基因突變，篩查高危人群，能夠較其他腫瘤更易于早期防控。BRCA1和BRCA2是最主要的乳腺癌易感基因，在發(fā)達國家已開展這兩個基因的商業(yè)化檢測，并具有專業(yè)的遺傳咨詢機構(gòu)。但是在中國，特別是大陸地區(qū)，從21世紀初才有相關(guān)報道，多為單中心研究，存在病例數(shù)少，缺乏

2、整體代表性的缺點，導致中國人群BRCA1/BRCA2的突變譜存在明顯偏小，與占全世界1/5人口的國情不相符。本研究旨在研究中國乳腺癌高危人群BRCA1/BRCA2突變位點，對比其他種族，進行全面分析總結(jié)，以及與臨床病理學特征的關(guān)系，為制定適合中國人群的BRCA1/BRCA2遺傳檢測策略奠定基礎(chǔ)。
　　 方法與對象: 本課題主要分為兩部分研究。第一部分:通過PCR-測序方法，檢測62例中國浙江地區(qū)家族性乳腺癌患者的BRCA1胚系突

3、變，并分析其臨床病理學特征。家族性乳腺癌患者入選標準:(1)家系中至少有2個一級或者二級親屬患原發(fā)性乳腺癌，不考慮發(fā)病年齡;2）乳腺癌患者，其一級或者二級親屬患原發(fā)性卵巢癌。所有受試者均獲得知情同意。由DNA抽提試劑盒提取所有患者的外周血DNA。第二部分:在生物信息學數(shù)據(jù)庫中，通過檢索關(guān)鍵詞，收集所有發(fā)表<中文作者一>=于2012年9月之前的BRCA1/BRCA2在中國乳腺癌高危人群中的突變研究文獻，匯總所有點突變位點以及大基因組重排，

4、進行分析總結(jié)。
　　 結(jié)果:
　　 第一部分研究:
　　 (1)在62例中國浙江地區(qū)家族性乳腺癌患者中，總共有7例發(fā)生BRCA1胚系致病性突變，突變率為11.3％(7/62)。其中2個為新發(fā)現(xiàn)的突變位點(3414delC和5208C＞T)，2個突變位點重復出現(xiàn)（5273G＞A和5589del8）。另外3273C＞T和4184del4在中國人群中首次被報道。
　　 (2) BRCA1突變相關(guān)乳腺癌主要表現(xiàn)為

5、發(fā)病年齡提前，ER/PR陰性率和三陰性率高（ER、PR和HER2均為陰性），并且腫瘤病理分級高的特點。
　　 第二部分研究:
　　 (1)共檢索到有效文獻21篇，其中涉及BRCA1點突變的文獻16篇，BRCA2點突變的文獻11篇，BRCA1/BRCA2大基因組重排的文獻5篇。
　　 (2)在點突變的檢測方法中，早期的研究以PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)-DNA測序方法為主，作為高敏感性的PCR-變性高效液相色

6、譜分析(DHPLC)-DNA測序的方法也常被采用，最新的文獻主要采用準確性更高的PCR-DNA測序方法。
　　 (3) BRCA1點突變的乳腺癌患者共103例，在中國家族性乳腺癌中的突變率為5.0％(52/1045)，年輕乳腺癌中的突變率為3.7％(20/546)。
　　 (4) BRCA2點突變的乳腺癌患者共91例，在中國家族性乳腺癌中的突變率為6.7％(51/757)，年輕乳腺癌中的突變率為3.2％(10/313)。

7、
　　 (5)點突變大部分位于基因的第11號外顯子，其中位于第11號外顯子的點突變占BRCA1所有點突變的56.3％(58/103)，占BRCA2所有點突變的53.8％(49/91)。
　　 (6)在所有點突變中，移碼突變是最常見的突變類型，其在BRCA1所有點突變中占63.1％(65/103)，在BRCA2所有點突變中占74.7％(68/91)。
　　 (7)一些點突變位點在中國乳腺癌高危人群中被反復報道。BR

8、CA1和BRCA2中最常見的突變位點分別是5899del8和3109C＞T，分別占各自基因所有點突變的10.7％(11/103)和4.4％(4/91)。
　　 (8)在BRCA1致病性點突變中，有56.3％的突變在BIC數(shù)據(jù)庫中未被報道;在BRCA2致病性點突變中，有47.9％的突變在BIC數(shù)據(jù)庫中未被報道。
　　 (9)在5篇BRCA1/BRCA2大基因重排研究文獻中，采用的方法都為多重連接依賴探針擴增技術(shù)(MLPA)

9、。
　　 (10)總共有7例發(fā)生大基因組重排，其中BRCA1和BRCA2分別為5例和2例，占BRCA1/BRCA2所有突變的3.5％(7/201)。
　　 結(jié)論: 根據(jù)本研究的結(jié)果，認為:(1)在中國乳腺癌高危人群中，雖然BRCA1/BRCA2的總突變率較高加索人群低，但仍需要進行這兩個基因的胚系突變檢測，有助于高危人群的早期篩查;(2)重復出現(xiàn)的突變位點，如BRCA15899del8和BRCA23109 C＞T等，在突

10、變篩查時應(yīng)首先被檢測，突變陰性者再檢測第11號外顯子，通過該流程可能會降低檢測成本、提高檢測效率;(3)中國乳腺癌高危人群的BRCA1/BRCA2突變譜具有種族特異性，有50％左右的突變位點在其他種族中未被報道;(4) BRCA1/BRCA2大基因組重排在中國乳腺癌高危人群中同樣存在，在遺傳篩查應(yīng)被常規(guī)推薦;(5)中國人群的BRCA1突變?nèi)橄侔┰谂R床病理學特征上與高加索人群存在相似性，對于制定篩查基因突變?nèi)巳旱脑\斷模型具有一定的參考價值