脆性組氨酸三聚體基因及錯(cuò)配修復(fù)基因hMSH2、hMLH1在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文脆性組氨酸三聚體基因及錯(cuò)配修復(fù)基因hMSH2、hMLH1在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義姓名：谷建琦申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張英懷張杰英20050301中文摘要外均未見到相關(guān)報(bào)道，在其它腫瘤的報(bào)道也比較少見。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)方法研究MIThMSH2及hMLH1在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)、意義及相互關(guān)系。旨在進(jìn)一步闡明FHIThMSH2及hMLHI在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的作用機(jī)制，以期為口腔鱗狀

2、細(xì)胞癌的臨床預(yù)防和治療提供新思路。方法:選取存檔的69例OSCC組織和40例正?？谇徽衬そM織，分為試驗(yàn)組(OSCC組)和對照組(NM組)。將每個(gè)蠟塊切為45um的切片，共切5張，一張HE染色，一張陰性對照，其余3張分別行FHIThMSH2和hMLH1免疫組化染色。步驟如下:切片常規(guī)脫蠟水化:3%HZO:甲醇液振洗25分鐘，以封閉內(nèi)源性過氧化物酶微波抗原修復(fù)，9298℃修復(fù)15分鐘，室溫冷卻正常山羊血清封閉，37“C孵育30分鐘傾去血清，

3、滴加一抗，4℃過夜滴加生物素化二抗，370C孵育25分鐘滴加辣根酶標(biāo)記的鏈酶卵白素，370C孵育20分鐘DAB顯色后，蘇木素復(fù)染，脫水，透明，樹脂封固。除血清封閉步驟外其余各步驟后均以PBS振洗35分鐘三次。分別用已知MIT陽性的正常乳腺標(biāo)本，hMSH2及hMLHI陽性的大腸標(biāo)本作為陽性對照。以PBS代替一抗作為陰性對照。MIT陽性結(jié)果判定:以細(xì)胞核或漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒者為陽性，采用半定量積分法，即對每張切片的染色強(qiáng)度和染色范圍分別進(jìn)行