大腸癌發(fā)生過(guò)程中錯(cuò)配修復(fù)蛋白hMSH2、hMLH1表達(dá)的意義.pdf

1、背景與目的：大腸癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)。同其他腫瘤一樣，大腸癌的發(fā)生也是細(xì)胞中多種基因異常表達(dá)的結(jié)果?；虻漠惓１磉_(dá)常與其突變相關(guān)，而基因突變?cè)贒NA復(fù)制過(guò)程中是不可避免的。為維護(hù)細(xì)胞基因組的穩(wěn)定，正常細(xì)胞擁有一套完整的基因修復(fù)系統(tǒng)。已知細(xì)胞中DNA修復(fù)系統(tǒng)有5種：(1)錯(cuò)配修復(fù)(mismatch repair,MMR)：(2)核苷酸切除修復(fù)(nucleotide excisionrepair，NER)；(3)堿基切

2、除修復(fù)(base excision rePm5 BER)；(4)損傷直接修復(fù)(damage reverse repair，DRRl)；(5)同源重組修復(fù)(1lomologous recombinationalrepair,HRR)和非同源重組修復(fù)(inon-homologous end joining，NHEJ)。大腸黏膜由不穩(wěn)定細(xì)胞構(gòu)成，其DNA無(wú)時(shí)不處于復(fù)制過(guò)程中，因此DNA修復(fù)系統(tǒng)及機(jī)能的完整對(duì)保證復(fù)制保真性尤為重要。MMR基因是

3、一種DNA修復(fù)基因，在整個(gè)修復(fù)系統(tǒng)中最早發(fā)揮作用，擔(dān)負(fù)著對(duì)錯(cuò)配位點(diǎn)的識(shí)別和切除的功能。自1993年第一個(gè)MMR基因hMSH2被成功克隆至今，人們已分離出9種錯(cuò)配修復(fù)基因，其中hMSH2、hMLH1基因是錯(cuò)配修復(fù)基因中最為重要的兩個(gè)。 現(xiàn)已明確MMR基因功能障礙是遺傳性非息肉性大腸癌(hereditarynonpolyposis colorectal carcinoma HNPCC)發(fā)病的遺傳學(xué)基礎(chǔ)。國(guó)內(nèi)、外也有研究報(bào)道其表達(dá)異

4、常與胃癌、腦腫瘤、肺癌及子宮內(nèi)膜癌等腫瘤的發(fā)病相關(guān)。國(guó)外已有較多報(bào)道MMR基因功能異常與散發(fā)性大腸癌發(fā)病相關(guān)的報(bào)道，而國(guó)內(nèi)有關(guān)該基因蛋白在散發(fā)性大腸癌中的表達(dá)的情況的報(bào)告較少。特別是有關(guān)癌旁黏膜該蛋白產(chǎn)物表達(dá)情況的報(bào)告較少。然而了解這些黏膜細(xì)胞的基因及產(chǎn)物的表達(dá)情況可能有助于了解大腸癌的發(fā)病機(jī)制及建立大腸癌的預(yù)警平臺(tái)。本研究通過(guò)大樣本檢測(cè)大腸癌、癌旁黏膜和正常人大腸黏膜DNA錯(cuò)配修復(fù)基因蛋白的表達(dá)情況，分析國(guó)人散發(fā)性大腸癌的發(fā)生與。MM

5、R基因表達(dá)的關(guān)系，探討MMR基因蛋白表達(dá)異常對(duì)大腸癌發(fā)生及演進(jìn)的意義。 材料與方法：收集大連市多家三甲醫(yī)院1999年1月-2006年8月間手術(shù)切除大腸癌標(biāo)本163例，其中40例取到癌旁黏膜，所有標(biāo)本取得前患者均未接受化學(xué)藥物或放射治療：另取正常人的大腸黏膜37例，用于對(duì)照。用免疫組織化學(xué)方法(SP法)分別檢測(cè)大腸癌組、癌旁黏膜組及正常黏膜組錯(cuò)配修復(fù)基因hMSH2、hMLH1的表達(dá)情況，通過(guò)分析不同黏膜MMR蛋白的表達(dá)及其表達(dá)與

6、患者年齡、性別、腫瘤發(fā)生的部位、分化程度、浸潤(rùn)深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，探討大腸癌的發(fā)病機(jī)制。結(jié)果：大腸癌組、癌旁黏膜組與正常黏膜組hMSH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為：46.6﹪(76/163)、27.5﹪(11/40)與21.6﹪(8/37)，大腸癌組顯著高于癌旁黏膜組及正常黏膜組(P<0.05)，但后兩組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)；hMLH1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為：20.9﹪(34/163)、5﹪(2/40)與5.4﹪(2/37)，大

7、腸癌組明顯高于癌旁黏膜組及正常黏膜組(P<0.05)，而后兩組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。 低年齡組(≤55歲)、中間組(55-65歲)與高年齡組(≥65歲)，hMSH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為50﹪(22/44)、38.46(15/39)與48.75﹪(39/80)，各組間均無(wú)顯著差異(P>0.05)；hMLH1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為9.09﹪(4/44)、20.5﹪(8/39)與26.25﹪(21/80)，高齡組明顯高于低齡組(

8、P<0.05)，但高齡與中間組及中間組與低齡組間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。 男、女性大腸癌患者h(yuǎn)MSH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為46.3﹪(44/95)與47.1﹪(32/68)，兩組間無(wú)顯著差異(P>0.05)：hMLH1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為18.9﹪(18/95)與23.5﹪(16/68)，兩組間亦無(wú)顯著差異(P>0.05)。直腸與結(jié)腸(從乙結(jié)腸至盲腸)hMSH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為55.8﹪(67/120)與25.6﹪(1

9、1/43)，兩組間有顯著差異(P<0.05)：hMLH1蛋白表達(dá)陽(yáng)性率分別為25﹪(30/120)與9.3﹪(4/39)，兩者間有顯著差異(P<0.05)。在高.中分化癌與低分化組hMSH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.8﹪(64/143)與60﹪(12/20)，兩組間無(wú)顯著差異(P>0.05)；hMLHl蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為：21.7﹪(31/143)與15﹪(3/20)，兩組間亦無(wú)顯著差異(P>0.05)。病變未侵及漿膜與侵及漿膜層組h

10、MSH2蛋白陽(yáng)性率分別為56.4﹪(31/55)與41.7﹪(45/108)，兩組間無(wú)顯著差異(P>0.05)；hMLH1分別為20﹪(46/55)與21.3﹪(23/108)，兩組間亦無(wú)顯著差異(P>0.05)。在無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移組與淋巴轉(zhuǎn)移組hMSH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.2﹪(53/120)與53.5﹪(23/43)，兩組間無(wú)顯著差異(P>0.05)：hMLH1蛋白陽(yáng)性率分別為21.7﹪(26/120)與18.6﹪(8/43)，兩者

11、間亦無(wú)顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1 大腸癌有hMSH2和hMLH1蛋白的表達(dá)上調(diào)。 2.直腸癌hMSH2和hMLH1蛋白表達(dá)高于結(jié)腸癌。說(shuō)明直腸部位黏膜DNA易發(fā)生錯(cuò)配性損傷，提示不同部位大腸癌的發(fā)病機(jī)制可能不同。 3.在高齡大腸癌患者h(yuǎn)MLH1蛋白表達(dá)上調(diào)明顯。提示隨著患者年齡增高腸粘膜發(fā)生錯(cuò)配的機(jī)會(huì)可能增加。這可能是高齡患者大腸癌發(fā)病機(jī)制之一。 4.檢測(cè)MMR蛋白hMSH2、hMLHl有助