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1、本文采用共振散射法系統(tǒng)地研究了血紅蛋白(Hb,hemoglobin)分別與有機(jī)酸性染料:鉻天青S、曙紅、鋁試劑及茜素紅的相互作用。探討了血紅蛋白與以上不同染料反應(yīng)的最佳條件、影響因素,建立了測(cè)定血紅蛋白的新方法并對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行了測(cè)定。本文的四種方法:操作方便,試樣前處理簡(jiǎn)單,成本低,為血紅蛋白的分析測(cè)定提供了一些借鑒。本論文全文分為五章。
第一章為緒論,介紹了有關(guān)血紅蛋白分析測(cè)定的研究進(jìn)展,對(duì)使用的方法進(jìn)行了綜述,并提出了
2、實(shí)驗(yàn)設(shè)想。
第二章用共振散射法研究了鉻天青S與血紅蛋白的反應(yīng)。首先考察了使用不同pH值緩沖溶液的反應(yīng)情況。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),加入pH3.80的Clark-Lubs緩沖溶液后,反應(yīng)現(xiàn)象明顯,并且在378nm處有最大散射值。共振散射強(qiáng)度的增加值△I與血紅蛋白濃度在一定范圍內(nèi)(0.04-9.60μg/mL)呈線性關(guān)系,線性回歸方程為:△I=18.36CHb+6.403,相關(guān)系數(shù)R=0.9967,檢出限為0.029μg/mL。將方法用
3、于人尿液中血紅蛋白含量的測(cè)定,結(jié)果滿意。同時(shí)進(jìn)行了離子強(qiáng)度試驗(yàn)和表面活性劑試驗(yàn),初步研究了反應(yīng)機(jī)理,鉻天青S與血紅蛋白之間主要以靜電引力相結(jié)合。
第三章用共振散射法研究了曙紅與血紅蛋白的反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)中比較了多種酸性緩沖溶液對(duì)反應(yīng)的效果,使用pH3.20的Clark-Lubs緩沖溶液能有較好的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,并確定了最佳反應(yīng)條件,探討了影響因素。在362nm處、血紅蛋白濃度在0.16-8.80μg/mL范圍內(nèi)與共振散射強(qiáng)度增值△I呈
4、正比關(guān)系,線性回歸方程是:△I=14.01CHb-2.193,相關(guān)系數(shù)R=0.9980,檢出限為0.071μg/mL。方法可用于測(cè)定人尿液中微量血紅蛋白含量。
第四章用共振散射法研究了鋁試劑與血紅蛋白的反應(yīng)。在pH4.88的醋酸鈉-醋酸(NaAc-HAc)緩沖溶液中,鋁試劑與血紅蛋白發(fā)生反應(yīng),使體系的共振散射強(qiáng)度增強(qiáng),最大散射波長(zhǎng)位于438nm處,在最佳條件下,測(cè)定血紅蛋白的線性范圍是0.048-9.60μg/mL,線性回
5、歸方程:△I=18.19CHb-3.956,相關(guān)系數(shù)R=0.9960,檢出限為0.031μg/mL。將方法用于人尿液中血紅蛋白含量的測(cè)定,結(jié)果滿意。
第五章運(yùn)用共振散射法研究了茜素紅與血紅蛋白的反應(yīng)。比較了在不同酸性溶液中的反應(yīng)情況,確定使用稀硫酸溶液為反應(yīng)介質(zhì)。在最佳條件下,在最大散射波長(zhǎng)520nm處,共振散射強(qiáng)度的增加值△I與血紅蛋白濃度在0.05-14.00μg/mL間呈正比關(guān)系,線性回歸方程是:△I=23.11CH
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