常見海洋污染物對褐菖鲉肝HSP60和HSP70蛋白含量的影響.pdf

1、熱應激蛋白(Heat Shock Proteins，HSPs)是一種生物體內(nèi)普遍適用并高度存在的應激蛋白，在外界污染影響下，HSPs的表達量發(fā)生變化，能快速保護細胞對抗外源性或內(nèi)源性應激的攻擊，提高細胞的修復能力并增強細胞對付應激的耐受程度。HSPs的誘導被認為是反映環(huán)境污染狀況最靈敏的生物學反應之一，本文著重研究海洋魚類HSP60和HSP70蛋白對常見海洋污染物的響應規(guī)律，探討作為生物標志物的可行性。
　　本研究利用蛋白印跡法測

2、定不同濃度石油水溶性成分(water soluble fraction，WSF)(20μg·L-1、40μg·L-1、80μg·L-1、160μg·L-1、320μg·L-1)、Cd和Pb(0.8μg·L-1、4.0μg·L-1、8.0μg·L-1、40μg·L-1、80μg·L-1)單獨污染后，以及WSF和重金屬復合污染后褐菖鲉肝HSP60和HSP70的表達量，分析不同類型污染后HSP60和HSP70蛋白含量之間的濃度-效應和時間-效

3、應規(guī)律。主要研究結(jié)果如下:
　　(1) WSF單獨污染的劑量-效應實驗表明，不同濃度WSF單獨污染5d后對HSP60和70蛋白含量都沒有顯著影響，但延長暴露時間可顯著誘導HSP70的表達，抑制HSP60的表達。
　　(2)重金屬單獨污染的劑量-效應實驗表明，0.8μg·L-1的Cd顯著抑制HSP60蛋白的表達，但是4.0μg·L-1和更高劑量的Cd顯著誘導HSP60的表達。Pb整體而言顯著抑制HSP60蛋白的表達。Cd和Pb

4、對HSP70的劑量-效應影響規(guī)律非常相似:在0.8μg·L-1時即出現(xiàn)顯著抑制，在4.0μg·L-1恢復至對照組水平，隨濃度增大，HSP70蛋白含量又出現(xiàn)顯著下降，整體表現(xiàn)為抑制效應。
　　(3)重金屬單獨污染的時間-效應實驗則顯示Cd和Pb對HSP蛋白含量的影響規(guī)律非常不同。Cd在暴露的第6d才開始顯著誘導HSP60蛋白含量，且隨時間延長蛋白含量保持穩(wěn)定;而HSP70蛋白在第2d即被顯著誘導并達到最大值，為對照的4.18倍，隨后

5、緩慢下降至對照水平。Pb僅在第10d顯著誘導HSP60和HSP70蛋白的表達，分別是對照的3.0倍和7.5倍。
　　(4)復合污染的劑量-效應實驗表明，隨著WSF+Pb濃度的增大，HSP60和HSP70蛋白表達量增加，且HSP60被顯著誘導。但當WSF濃度超過80μg·L-1之后，HSP60蛋白表達被顯著抑制。HSP70在80μg·L-1WSF+8μg·L-1Pb時被顯著誘導，其他濃度時HSP70蛋白表達則沒有顯著變化。WSF+C

6、d復合污染對HSP70的影響不顯著。并且只有40μg·L-1WSF及80μg·L-1WSF和40μg·L-1Cd復合污染時才會顯著誘導HSP60表達，其他濃度對HSP60的影響也不顯著。
　　(5)復合污染的時間-效應實驗結(jié)果表明，WSF+Pb復合污染顯著抑制HSP70蛋白的表達;在污染的第2d誘導HSP60的表達，但在第8d卻又抑制HSP60的表達。HSP60、HSP70蛋白含量隨WSF+Cd復合污染時間延長有所波動，但都沒有達