中藥成分對延邊黃牛耳成纖維細胞活力和氧化修復能力的影響.pdf

1、【目的】
　　本試驗通過在延邊黃牛耳成纖維細胞體外培養(yǎng)液中分別添加中藥成分淫羊藿苷、小檗堿和川芎嗪來驗證其對延邊黃牛耳成纖維細胞活力和氧化修復的影響，確定中藥成分提高延邊黃牛耳成纖維細胞活力的最佳濃度及評估其對氧化損傷細胞修復能力。為改進延邊黃牛耳成纖維細胞在延邊黃牛體細胞克隆中的應用和日后延邊黃牛的保種工作提供技術支持。
　　【方法】
　　1.體外培養(yǎng)延邊黃牛耳成纖維細胞至第四代后，在DMEM培養(yǎng)液中分別添加不同濃度

2、的淫羊藿苷、小檗堿和川芎嗪，培養(yǎng)24、48、72、96小時后，用MTT法測出細胞活力并對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，篩選出最佳濃度。
　　2.在DMEM培養(yǎng)液中同時添加兩種最佳濃度中藥成分，培養(yǎng)96h后，用MTT法測出細胞活力并對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　3.氧化損傷的延邊黃牛耳成纖維細胞中分別添加最佳濃度的淫羊藿苷、小檗堿和川芎嗪，培養(yǎng)96h后，用 MTT法測出細胞活力，對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析后與細胞的對照組和自我修復組作比較

3、，評估它們的氧化修復能力。
　　【結果】
　　1.在淫羊藿苷對牛耳成纖維細胞的影響試驗中，淫羊藿苷試驗組均能提高延邊黃牛耳成纖維細胞的活力。淫羊藿苷濃度范圍在0.001μg/ml~0.1μg/ml的細胞培養(yǎng)到72h后，細胞活力均顯著高于對照組。其中，濃度為0.001μg/ml提高細胞活力效果最好。
　　2.在小檗堿對牛耳成纖維細胞的影響試驗中，小檗堿濃度范圍在0.01μmol/L~1μmol/L均能提高延邊黃牛耳成纖維

4、細胞活力，而且培養(yǎng)到72h后細胞活力均顯著高于對照組。其中，濃度為1μmol/L提高細胞活力效果最好。
　　3.在川芎嗪對牛耳成纖維細胞的影響試驗中，川芎嗪濃度范圍在25μg/ml~50μg/ml均能夠提高延邊黃牛耳成纖維細胞活力。其中，濃度為50μg/ml提高細胞活力效果最好，細胞培養(yǎng)到72h后細胞活力顯著高于對照組。
　　4.在中藥成分聯(lián)合作用對延邊黃牛耳成纖維的影響試驗中，川芎嗪和小檗堿試驗組、小檗堿和淫羊藿苷試驗組抑

5、制了延邊黃牛耳成纖維細胞的活力，而川芎嗪和淫羊藿苷試驗組能提高延邊黃牛耳成纖維細胞的活力，但與對照組不存在顯著差異。
　　5.在淫羊藿苷對延邊黃牛耳成纖維細胞氧化損傷的修復試驗中，淫羊藿苷修復組的細胞活力與自我修復組相比差異性顯著，而對照組的細胞活力比淫羊藿苷修復組高，但差異性不顯著。結果表明：淫羊藿苷具有氧化修復能力。
　　6.在小檗堿對延邊黃牛耳成纖維細胞氧化損傷的修復試驗中，小檗堿修復組的細胞活力與自我修復組相比差異性