比格犬糞便菌群16S rRNA多樣性分析及主要益生菌的分離鑒定.pdf

1、Qingdao Agricultural UniversityThe Thesis of Professional MasterExplore the intestinal flora of beagle dog by 16S rRNADiversity Analysis，Isolation and Identification ofmain probioticsGraduate with Professional Master Deg

2、ree：Liu HuiMentor: Jianxin WenSecond Mentor: Guoqing LiuType of Professional Degree：Master of Veterinary MedicineMay, 2017青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文 摘要1比格犬 比格犬糞便菌群 糞便菌群 16S rRNA 多樣性 多樣性分析 分析及主要益生菌的分離鑒定 主要益生菌的分離鑒定摘 要比格犬在生命科學(xué)上的研究意義重大，

3、比格犬糞便菌群分析是非常有必要的。本試驗對比格犬糞便中微生物的 16S rRNA V4 區(qū)域 DNA 進行測序，對大量數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，揭示糞便中微生物的種類以及它們之間的相對豐度和進化關(guān)系，探討糞便微生物的多樣性。通過分析可知不同年齡段的比格犬糞便菌群的多樣性和結(jié)構(gòu)都有所不同。比格犬專用微生態(tài)制劑的研究迫在眉睫。本研究從比格犬糞便內(nèi)分離并選擇 4 株常見益生菌，對其進行分離純化，形態(tài)學(xué)、生理生化、分子生物學(xué)鑒定及生物學(xué)特性研究：生長曲

4、線測定，耐熱性、耐酸性、耐膽鹽、耐胃液、耐腸液試驗。試驗結(jié)果表明：43 號菌為乳白色菌落，有特殊酸味，經(jīng)鑒定為嗜酸乳酸桿菌（Lactobacillus acidophilus）。18 號菌常成對出現(xiàn)，在 KF培養(yǎng)基上呈棗紅色，經(jīng)鑒定為屎腸球菌（Enterococcus faecium）。25 號菌在培養(yǎng)基上呈不規(guī)則圓形，邊緣不整齊，有粘滯感，經(jīng)鑒定為地衣芽胞桿菌（Bacillus licheniformis）。1 號菌在 WL 培養(yǎng)基上

5、綠色，生長速度較慢，經(jīng)鑒定為熱帶假絲酵母菌（Candida tropicalis）。實際生產(chǎn)過程中，43 號菌、18 號菌應(yīng)當(dāng)尤為注意加工溫度和時間的控制。這四株菌在強酸強堿環(huán)境中性能良好，為實際生產(chǎn)應(yīng)用提供參考。安全性試驗顯示，這四株菌對小白鼠無致死性，無毒副作用。試驗組與對照組小白鼠體重、體溫?zé)o顯著性差異（P >0.05）。25 號菌可能對公鼠和母鼠腎臟有促進生長的作用，18 號菌對公鼠有促進作用。43 號、18 號、25 號