siRNA干擾NgR及聯(lián)合NT-3對(duì)大鼠脊髓損傷修復(fù)的影響.pdf

1、目的:研究siRNA干擾NgR及聯(lián)合NT-3基因轉(zhuǎn)染的神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)大鼠脊髓損傷修復(fù)的影響。
　　方法:選用SD大鼠108只，雌雄不限，體重200g-250g。完全隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=27)、手術(shù)對(duì)照組(n=27)、NgR-siRNA組(n=27)和NgR-siRNA聯(lián)合NT-3組(n=27)。按照手術(shù)后以下9個(gè)時(shí)間點(diǎn)12h、1d、2d、3d、5d、7d、14d、21d和28d再分為9小組，每小組3只。制作大鼠脊髓T8水平后側(cè)半橫

2、斷直接切割模型。自損傷處向頭尾兩端緩慢注入相應(yīng)細(xì)胞懸液，5min內(nèi)注射完畢并留針5min，并用生物膠封閉針孔防止細(xì)胞懸液順針道溢出。相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取出橫斷切口上下各5mm，共10mm脊髓組織。利用QPCR、Wb測(cè)定bFGF、NGF、MBP基因及蛋白表達(dá)的變化，綜合評(píng)價(jià)siRNA干擾NgR及聯(lián)合NT-3對(duì)大鼠脊髓損傷后修復(fù)的影響。對(duì)所得數(shù)據(jù)用均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行描述;組內(nèi)比較采用方差分析，并采用SNK法行兩兩間比較。
　　結(jié)果:1、QPCR

3、基因表達(dá)結(jié)果示:siRNA干擾NgR聯(lián)合NT-3組優(yōu)于siRNA干擾NgR組，而siRNA干擾NgR組優(yōu)于手術(shù)對(duì)照組。2、Wb結(jié)果示:bFGF表達(dá)在術(shù)后3周內(nèi)siRNA干擾NgR聯(lián)合NT-3組優(yōu)于假手術(shù)組，到第4周bFGF與假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)區(qū)別;NGF表達(dá)在術(shù)后3天內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)差異;1周到3周這段時(shí)間，各實(shí)驗(yàn)組NGF表達(dá)量均高于假手術(shù)組，各實(shí)驗(yàn)組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;MBP表達(dá)量術(shù)后第1天到第四周，siRNA干擾NgR聯(lián)合NT-