NGF聯(lián)合VEGF對脊髓損傷的修復作用.pdf

1、目的：實驗探討神經(jīng)生長因子（nerve growth factor,NGF）聯(lián)合血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)修復脊髓急性損傷的可行性和療效，并觀察二者的協(xié)同作用。
　　 方法：
　　 1.建立脊髓損傷模型（動物實驗）。選擇成年SD大鼠，體重180-220g。采用Aliens打擊器以250gmm能量打擊T9-T10段脊髓，致脊髓鈍挫傷，從而建立脊髓鈍挫傷

2、模型。同時于模型L3-L4段脊髓處硬膜下置管，置管處肌肉及皮下固定，延長管部分體外固定并可控性封堵體外延長管管口，以備注射因子使用。將大鼠脊髓損傷模型隨機分成生理鹽水(NS)對照組（A組），NGF組（B組），NGF+VEGF組（C組）三個組，每組各10只大鼠模型，共計模型30只，使用微量注射器自所置管的體外延長管口處分別注射NS、NGF及NGF+VEGF。
　　 2.實驗觀察。分別在損傷并注射生長因子后不同時段（1周至8周，每周

3、一次）對全部損傷實驗模型進行肢體活動的BBB評分。8周后將全部模型行灌注處死，取完整脊髓標本切片進行組織學檢查，包括HE染色和免疫組織化學染色鑒定，從而評價各組對脊髓損傷的修復作用。
　　 結(jié)果
　　 1.肢體運動BBB評分：第1周及第2周三個組評分差距不明顯。自第3周起B(yǎng)組和C組BBB評分要高于A組，(P<0.05)，C組自4周后明顯優(yōu)于A組和B組(P<0.01)。
　　 2.組織學檢查：HE染色顯示A組損傷脊

4、髓部分及鄰近節(jié)段位置組織形態(tài)不明顯，脊髓呈斷裂撕裂狀；B組和C組損傷脊髓部分及鄰近節(jié)段位置組織結(jié)構(gòu)相對完整，有一定的連續(xù)性，部分可見相對完好的神經(jīng)元及血管內(nèi)皮細胞，且C組要優(yōu)于B組。免疫組織化學染色鑒定顯示C組的雙因子聯(lián)合應用可促進軸突的再生并減少神經(jīng)元的凋亡，且C組可明顯促進血管內(nèi)皮細胞的生長。通過計數(shù)每個高倍視野內(nèi)凋亡神經(jīng)元的個數(shù)和白質(zhì)內(nèi)血管數(shù)，進行平均數(shù)比較和方差分析，凋亡神經(jīng)元數(shù)A組>B組>C組，白質(zhì)內(nèi)血管數(shù)A、B組大致相當，均