兔產氣莢膜梭菌病、大腸桿菌病病原的分離鑒定及其二聯(lián)油乳劑滅活疫苗的研制.pdf

1、兔產氣莢膜梭菌、大腸桿菌是引起幼兔細菌性腹瀉的最主要的兩種病原菌，由它們引起的幼兔腹瀉發(fā)病率和死亡率均較高，給兔業(yè)養(yǎng)殖戶帶來重大經濟損失。為了更好地控制疾病，我們從不同兔場具有典型癥狀的患病兔病料中分離出了兔產氣莢膜梭菌和大腸桿菌，并進行鑒定，篩選免疫原性較優(yōu)的菌株作為菌種制作二聯(lián)油乳劑苗對兔的這兩種傳染病進行預防，取得了良好效果。研究內容如下： 兔產氣莢膜梭菌病病原的分離鑒定對20份可疑病兔病料進行病原菌分離鑒定，共分離到17

2、株有莢膜、有芽孢的革蘭氏陽性粗大桿菌，分離菌株在綿羊全血瓊脂平板上培養(yǎng)后形成雙溶血圈。動物回歸試驗證實，分離菌可致兔發(fā)病死亡，并從試驗致死兔病料中分離到了與自然病例相一致的細菌，結合臨床癥狀、病理變化、生化試驗和血清學試驗結果等，判定其為兔A型產氣莢膜梭菌。 兔大腸桿菌病病原的分離鑒定從6個兔場送檢的發(fā)病兔病料中分離到27株革蘭氏陰性球桿菌，菌落在麥康凱瓊脂平皿上成紅色，生化試驗結果均符合大腸桿菌特征，結合病理變化，確定病原菌為

3、大腸桿菌，分離菌對青霉素、氨芐青霉素耐受，對其它藥物敏感程度存在較大差異。經致病性試驗篩選出21株致病性菌株，經血清型鑒定，21株大腸桿菌分屬O<,26>(4.7％)，O<,18>(19.1％)，O<,103>(28.5％)，O<,109>(33.3％)，O<,85>(4.7％)，O<,142>(4.7％)幾個血清型。在這6個血清型中，O<,103>，O<,109>，O<,18>占定型菌株的80.9％。 兔產氣莢膜梭茵病型、大腸

4、桿菌病二聯(lián)油乳劑滅活疫苗的研制用上述鑒定過的兔產氣莢膜梭菌和大腸桿菌作為制苗菌種接種適宜培養(yǎng)基進行大量增殖，采用膜過濾的方法進行濃縮，經甲醛滅活，按一定比例加入佐劑，制成兔產氣莢膜梭菌及大腸桿菌病多價二聯(lián)油乳劑滅活苗。多項實驗室試驗研究證明，該二聯(lián)苗穩(wěn)定性好，使用安全。實驗動物免疫后21天攻毒，對產氣莢膜梭菌病的保護率為91.6％對大腸桿菌保護率為83.3％。如東某兔場200多只仔兔免疫接種該二聯(lián)苗后，6個月來未發(fā)現(xiàn)一例可疑病例，有效預