宜賓市規(guī)?；u場大腸桿菌滅活油乳劑苗的研制與應(yīng)用.pdf

1、從宜賓市三個(gè)大腸桿菌病發(fā)病較嚴(yán)重的規(guī)?；u場選擇具有代表性、發(fā)病癥狀明顯的病雞或死雞，無菌采集樣本雞的心、肝、脾、氣囊、氣管和心血等病料，共獲得48個(gè)樣本材料。經(jīng)病料的涂片染色鏡檢、細(xì)菌的分離培養(yǎng)、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)與生化試驗(yàn)，表明分離所得共12個(gè)菌株的各項(xiàng)培養(yǎng)結(jié)果和生化特性符合大腸埃希氏桿菌的特性，結(jié)合病原毒力測定，可初步判定分離的菌株為雞致病性大腸桿菌，其中的1、4、5、7、8、11號(hào)菌株為雞強(qiáng)致病性菌株。將分離所得的6株強(qiáng)致病性菌株分

2、別接種到普通肉湯中擴(kuò)大培養(yǎng)16-18h，經(jīng)純度檢驗(yàn)和活菌計(jì)數(shù)合格后，以分離菌株為抗原，甲醛為滅活劑，10號(hào)白油為抗原油相，司本-80為油相乳化劑，硬脂酸鋁為穩(wěn)定劑，吐溫-80為抗原水相乳化劑，水相與油相的混合比例為1：1，制成含地方優(yōu)勢大腸桿菌血清型的多價(jià)滅活油乳疫苗；并對(duì)疫苗的物理性狀、安全性、疫苗免疫效力、最小免疫劑量、免疫保護(hù)期、疫苗保存期、田間免疫等進(jìn)行了初步研究。同時(shí)進(jìn)行了分離菌株的藥敏試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明： 1.12個(gè)

3、分離菌株的各項(xiàng)培養(yǎng)特性和生化特征符合大腸桿菌的特性，分離菌株均為大腸埃希氏桿菌，結(jié)合病原毒力測定，致病力較強(qiáng)且能產(chǎn)生腸毒素的致病性大腸桿菌有6株。 2.制成的雞大腸桿菌多價(jià)滅活油乳苗外觀呈均質(zhì)乳白色的油乳狀液體，物理性狀穩(wěn)定，為油包水型油乳劑。油乳苗的黏度單位為5s±0.4s，黏度適合注射，疫苗在4℃條件下的保存期不低于10個(gè)月。 3.制備的疫苗含有有效針對(duì)宜賓市引起雞大腸桿菌病的疫苗抗原，疫苗安全無副作用，試驗(yàn)組雞只接

4、種疫苗后無不良反應(yīng)，生長發(fā)育正常。雛雞的最小免疫劑量為0.3ml/只，育成雞為0.4ml/只。攻毒試驗(yàn)表明大腸桿菌油乳劑滅活苗對(duì)雞只的保護(hù)率為100％。疫苗的免疫保護(hù)期不少于180天。 4.在相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下進(jìn)行的田間試驗(yàn)中，試驗(yàn)組2000只雜交型仿土肉雞接種大腸桿菌多價(jià)滅活油乳苗后未發(fā)生雞大腸桿菌病，也未見因大腸桿菌病引起的死亡雞只；而對(duì)照組所飼養(yǎng)的2000只雜交型仿土肉雞因大腸桿菌病引起的死亡數(shù)為114只，平均死亡率為5.

5、7％。試驗(yàn)組因管理原因和其它疾病引起的總死亡率為7.25％，對(duì)照組為16.1％。免疫組與對(duì)照組差異均極顯著(P＜0.01)。說明在當(dāng)前宜賓市規(guī)?；B(yǎng)雞條件下，通過研制雞大腸桿菌多價(jià)油乳劑滅活苗進(jìn)行免疫接種，能夠有效降低和控制雞大腸桿菌病。 5.選擇常用的12種藥物對(duì)6個(gè)致病性較強(qiáng)的分離株大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果顯示對(duì)氟苯尼考、沙拉沙星、頭孢三嗪高度敏感，對(duì)丁胺卡那霉素、慶大霉素中度敏感，對(duì)新霉素、土霉素低度敏感，對(duì)氨芐青霉素、