山東地區(qū)Ⅰ群禽腺病毒的分離鑒定及多價(jià)油乳劑滅活疫苗的研制.pdf

1、包涵體肝炎(Inclusion Body Hepatitis，IBH)是由Ⅰ群禽腺病毒(Fowl adenovirusⅠ，F(xiàn)AV-Ⅰ)引起的雞的一種急性傳染病。近年來，包涵體肝炎在我國的發(fā)病呈上升趨勢(shì)，給肉雞飼養(yǎng)業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，本研究了解了山東省雞包涵體肝炎的流行情況，挑選了四株優(yōu)勢(shì)血清型毒株制備多價(jià)油乳劑滅活疫苗，其對(duì)雞包涵體肝炎的防治和養(yǎng)雞業(yè)的健康發(fā)展具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
　　本研究從山東部分地區(qū)采集疑似感染雞包

2、涵體肝炎的肉雞肝臟，卵黃囊接種5日齡SPF雞胚盲傳三代，收集尿囊液。經(jīng)PCR鑒定共分離到8株Ⅰ群禽腺病毒，分別命名為SDLY-1、SDLY-2、SDLY-3、 SDYT-1、SDYT-2、SDYN-1、SDYN-2、SDMY。血凝試驗(yàn)顯示分離毒株均無血凝性，擴(kuò)增分離毒株的Hexon基因序列，與GenBank中發(fā)表的其他血清型毒株Hexon基因序列比對(duì)，結(jié)果顯示，8個(gè)分離株中有2株與血清2型同源性較高，3株與血清10型同源性較高，3株與血

3、清12型同源性較高。動(dòng)物回歸試驗(yàn)結(jié)果顯示，發(fā)病雞的癥狀和剖檢變化與自然發(fā)病雞一致。
　　從本實(shí)驗(yàn)室近年來分離到的Ⅰ群禽腺病毒中，挑選出四株優(yōu)勢(shì)血清型毒株制成多價(jià)油乳劑滅活疫苗，并對(duì)疫苗的免疫效果進(jìn)行評(píng)估，對(duì)預(yù)防包涵體肝炎的發(fā)生和流行提供科學(xué)依據(jù)。將四株不同血清型的Ⅰ群禽腺病毒(FAV-2、FAV-8、FAV-10、FAV-12)接種SPF雞胚，收集尿囊液，經(jīng)甲醛滅活，以礦物油為佐劑制成多價(jià)油乳劑滅活疫苗，并對(duì)疫苗物理性狀，安全性，

4、最小免疫劑量、免疫效力及抗體消長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，抗原液以甲醛為滅活劑的最適終濃度為1‰，研制的疫苗為油包水劑型，無菌檢驗(yàn)合格，物理性狀穩(wěn)定。接種5日齡白羽肉雞，注苗后均無不良反應(yīng)，最小免疫劑量為0.3 mL/只。肉雞免疫2周后開始監(jiān)測(cè)其血清抗體水平，結(jié)果顯示，免疫后2周抗體效價(jià)已達(dá)5 ng/L以上，25 d左右抗體濃度達(dá)峰值，之后直至肉雞出欄，抗體效價(jià)均高于10ng/L，對(duì)照組一直無抗體產(chǎn)生。免疫后IFN-γ和IL-6含量分別在