阿托伐他汀鈣對乙醇所致H9C2心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　觀察H9C2心肌細(xì)胞在乙醇所致的氧化應(yīng)激損傷以及阿托伐他汀鈣對乙醇所致的H9C2心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用。
　　方法：
　　常規(guī)方法培養(yǎng)H9C2心肌細(xì)胞，在培養(yǎng)24h后隨機(jī)分組:正常對照組（Control組）、200mmol/L乙醇組（alcohol組）、10-7mol/L阿托伐他汀鈣預(yù)處理組，10-6mol/L阿托伐他汀鈣預(yù)處理組，10-5mol/L阿托伐他汀鈣預(yù)處理組，用MTT法檢測乙醇所致的氧化

2、應(yīng)激損傷心肌細(xì)胞存活率的影響以及經(jīng)阿托伐他汀鈣干預(yù)對心肌細(xì)胞存活率的影響;LDH、MDA、SOD試劑盒檢測乙醇所致的H9C2心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞及阿托伐他汀鈣對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。ROS檢測阿托伐他汀鈣的保護(hù)作用。
　　結(jié)果：
　　1、細(xì)胞存活率:不同濃度的乙醇對H9c2細(xì)胞存活率的影響與乙醇濃度有直接相關(guān)性，隨著乙醇濃度的升高H9c2細(xì)胞存活率呈逐漸下降趨勢。高濃度的阿托伐他汀鈣(10-4 mol/L)處理H9c2細(xì)胞

3、48小時的存活率為88.59％較對照組細(xì)胞存活率明顯降低(P＜0.01)，出現(xiàn)增殖抑制效應(yīng)，阿托伐他汀鈣終濃度為10-7mol/L～10-5mol/L時存活率為100.87±4.30％、95.03±10.23％、101.60±8.94％，與對照組相比對細(xì)胞存活率無影響。10-8mol/L～10-5mol/L阿托伐他汀鈣預(yù)處理24小時之后再加入乙醇處理24小時的H9c2細(xì)胞的存活率分別為56.38±5.63％，64.91±6.64％，73

4、.77±7.34％和90.69±8.66％，隨著阿托伐他汀鈣濃度的增加細(xì)胞存活率明顯升高。
　　2、乙醇組在乙醇作用后H9c2細(xì)胞受到損傷，LDH較對照組明顯增高，損傷后MDA亦較對照組明顯增高，SOD較對照組明顯降低。不同濃度阿托伐他汀鈣(10-7～10-5 mol/L)預(yù)處理24h后培養(yǎng)細(xì)胞，在乙醇損傷過程中，均較乙醇組細(xì)胞損傷小，表現(xiàn)為反映細(xì)胞損傷的指標(biāo)LDH分別為198.25±15.02U/L，166.06±17.32U/

5、L，112.67±16.88U/L;脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量分別為1.88.±0.09nmol/mg protein,1.67±0.13nmol/mg protein,1.19nmol/mgprotein;而起保護(hù)作用的SOD則較乙醇組明顯增加，分別為35.43.±3.04/mgprotein,42.67±4.22U/mg protein,51.42±4.93U/mg protein。
　　3、ROS活性:正常細(xì)胞負(fù)載DCF后在細(xì)

6、胞內(nèi)呈明亮的綠色熒光，其熒光強(qiáng)弱可反映ROS的變化。觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)乙醇處理24h后，細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度最強(qiáng)，用不同濃度阿托伐他汀鈣(10-7～10-5mol/L)預(yù)處理24h后，與乙醇組相比細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度分別下降。
　　結(jié)論：
　　本研究通過檢測LDH、MDA、SOD和ROS水平的變化可以驗證乙醇可對心肌細(xì)胞造成氧化應(yīng)激損傷，而阿托伐他汀鈣對乙醇所致H9c2細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷具有劑量依賴性保護(hù)作用。表明阿托伐他汀鈣具有抗氧化作用，減