多發(fā)性骨髓瘤中survivin基因、PDCD5基因和NOR1基因的甲基化水平.pdf

1、背景與目的:多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一種以骨髓中單克隆漿細(xì)胞大量增生為特征的惡性增殖性疾病，目前發(fā)病機制仍未明確。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，MM的發(fā)生發(fā)展與甲基化有著密切的關(guān)系。本研究擬檢測MM患者、正常對照組及KM3細(xì)胞株中survivin基因、PDCD5基因和NOR1基因的甲基化水平，以探討其意義。
　　方法:收集于2012年8月-2012年12月在中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院就診的5例多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓標(biāo)本（

2、均為復(fù)治患者），其中男性3例，女性2例，年齡從46至70歲，中位年齡58歲。對照組為5例非血液腫瘤患者骨髓標(biāo)本，其中男性1例，女性4例，年齡從22至58歲，中位年齡40歲，缺鐵性貧血4例，巨幼細(xì)胞性貧血1例。以多發(fā)性骨髓瘤KM3細(xì)胞株為標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，取對數(shù)期生長期細(xì)胞用于提取基因組DNA。采用飽和苯酚一氛仿抽提法分別提取MM患者骨髓標(biāo)本、非血液腫瘤患者骨髓標(biāo)本及KM3細(xì)胞基因組DNA，BSP法檢測MM患者、對照組及KM3細(xì)胞株中su

3、rvivin基因、PDCD5基因和NOR1基因CpG島的甲基化水平。
　　結(jié)果:利用BSP法獲得了survivin基因、PDCD5基因、NOR1基因上游啟動子區(qū)域CpG島的CpG位點甲基化圖譜，根據(jù)甲基化位點指數(shù)值=mCpG/(CpG+mCpG)，獲得結(jié)果如下:1）5例MM患者骨髓標(biāo)本survivin基因啟動子區(qū)的CpG島的甲基化水平分別為1.0％、0.5％、0.0％、0.5％、0.0％，5例對照組骨髓標(biāo)本survivin基因啟動

4、子區(qū)的CpG島的甲基化水平分別為0.5％、1.5％、2.5％、1.0％、0.0％，KM3細(xì)胞株中survivin基因啟動子區(qū)的CpG島的甲基化水平分別為0.0％。2)5例MM患者骨髓標(biāo)本PDCD5基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島2的甲基化水平分別為0.0％、1.8％、0.0％、1.4％、0.0％，5例對照組骨髓標(biāo)本PDCD5基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島2的甲基化水平分別為0.0％、0.0％、0.0％、1.4％、0.0％，KM3細(xì)胞株中PDC

5、D5基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島2的甲基化水平為0.0％。3）5例MM患者骨髓標(biāo)本NOR1基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島3的甲基化水平分別為0.0％、3.8％、3.8％、0.0％、2.5％，5例對照組骨髓標(biāo)本NOR1基因反義鏈啟動子區(qū)的CpG島3的甲基化水平分別為0.0％、1.2％、0.0％、0.0％、0.0％，KM3細(xì)胞株中NOR1基因的甲基化水平為100％。
　　結(jié)論:1）survivin基因啟動子區(qū)的CpG島在MM患者及非血液