卵巢癌腫瘤干細(xì)胞分化過程中支架蛋白IQGAP1變化的體外研究.pdf

1、目的:
　　探索支架蛋白IQGAP1在卵巢癌腫瘤干細(xì)胞的表達(dá)，并觀察IQGAP1對卵巢癌腫瘤干細(xì)胞分化過程中的侵襲能力的影響。
　　方法:
　　以漿液性卵巢癌3AO細(xì)胞株為親本細(xì)胞，無血清懸浮培養(yǎng)法獲得腫瘤干細(xì)胞。采用流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)記分子CD24表達(dá)，利用細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)觀察干性分子OCT4和SOX2的定位。利用含10％胎牛血清培養(yǎng)基誘導(dǎo)其分化，期間光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。
　　qRT-PCR法和W

2、estern-blot法分別檢測IQGAP1 mRNA和蛋白的表達(dá)水平變化。通過劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室觀察細(xì)胞遷移侵襲能力;采用wst-1法檢測細(xì)胞增殖能力。
　　結(jié)果:
　　1.利用3AO細(xì)胞株通過無血清培養(yǎng)法獲得表型CD24(-)表型的腫瘤干細(xì)胞。
　　2.相比3AO細(xì)胞株中，IQGAP1在腫瘤干細(xì)胞中呈低表達(dá)。
　　3.在3AO細(xì)胞株中，沉默IQGAP1后減弱了腫瘤遷移、侵襲能力，而不會改變細(xì)胞的