Ang-2在胃癌中的表達及其反義基因轉(zhuǎn)染對人胃癌細胞SGC-7901的影響.pdf

1、目的:探討促血管生成素-2(Angiopoietin-2，Ang-2)在胃癌組織中的表達及其與腫瘤病理分期的聯(lián)系;觀察反義Ang-2基因轉(zhuǎn)染對人胃癌細胞SGC-7901的影響。
　　方法:用Western Blot法檢測Ang-2蛋白在10例胃癌組織及10例正常胃組織中的表達，用免疫組化法檢測53例不同病理分期的胃癌組織中Ang-2蛋白的表達;應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將既往實驗合成[1]的pEGFP-N1-anti Ang-2轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)

2、的人胃癌細胞SGC-7901，以空載體(pEGFP-N1)轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染組作對照，RT-PCR及免疫組化檢測轉(zhuǎn)染后Ang-2基因及蛋白的表達， MTT法和流氏細胞術(shù)檢測反義Ang-2基因轉(zhuǎn)染對細胞生長和細胞調(diào)亡的影響;分別用上述三組細胞注射于裸鼠皮下，對比觀察腫瘤生成的速度和腫瘤組織中的血管生成數(shù)量。
　　結(jié)果:Ang-2蛋白在正常胃組織中不表達，在不同病理分期的胃癌組織中均成呈陽性表達(F=166.76，P＜0.0001); R

3、T-PCR及免疫組化顯示反義Ang-2基因轉(zhuǎn)染組無Ang-2 mRNA及Ang-2蛋白的表達，MTT法檢測顯示反義Ang-2基因轉(zhuǎn)染組細胞體外增殖能力明顯低于其他兩組(F=10.39，P=0.0024)，流氏細胞術(shù)檢測顯示活細胞比率明顯低于其它兩組(x2=3188.9805，P＜0.0001);轉(zhuǎn)染了反義Ang-2基因的胃癌細胞成瘤速度較其它兩組明顯減慢(第6天(F=10.18，P=0.0005)、第18天(F=7.8，P=0.0021

4、)及第30天(F=79.58，P＜0.0001)，腫瘤組織中血管生成的數(shù)量較其它兩組明顯減少(第1周(F=15.18，P＜0.0001)、第2周(F=3.50，P=0.0444)、第3周(F=39.02，P＜0.0001))。
　　結(jié)論:胃癌組織中Ang-2的表達與胃癌血管生成及胃癌侵襲能力密切相關(guān);反義Ang-2基因轉(zhuǎn)染可封閉人胃癌細胞SGC-7901中Ang-2mRNA及Ang-2蛋白的表達，抑制其體外生長，促進其凋亡;并對其