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1、目的:本文研究wortmannin對(duì)體外培養(yǎng)的SGC 7901人胃癌細(xì)胞系的抗瘤作用,并初步探討其作用機(jī)制。
方法:以SGC 7901人胃癌細(xì)胞為研究對(duì)象,將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為對(duì)照組、6.25nmol/Lwortmannin組、12.5nmol/L wortmannin組,處理24 h 后用相差顯微鏡觀察各組SGC7901細(xì)胞在大小、形態(tài)及生長(zhǎng)方式上的改變;將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為空白對(duì)照組、DMSO對(duì)照組、6.25nmol/L wort
2、mannin組、12.5nmol/L wortmannin組、25nmol/L wortmannin組、50 nmol/L wortmannin組。分別在藥物干預(yù)后24 h、48 h、72 h,用MTT法連續(xù)檢測(cè)各組SGC 7901細(xì)胞的增殖抑制率;將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為對(duì)照組、6.25nmol/Lwortmannin組、12.5nmol/L wortmannin組,用免疫組化法檢測(cè)各組Cyclin H、CyclinE、Cyclin D1 以及
3、Bcl-2、Bcl-xL蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:對(duì)照組SGC 7901細(xì)胞大小形態(tài)不一,疊加成堆生長(zhǎng),喪失接觸抑制和密度抑制,細(xì)胞增殖明顯。當(dāng)分別用6.25nmol/L、12.5nmol/L的wortmannin處理SGC 7901細(xì)胞24 h時(shí)后,細(xì)胞出現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)改變,表現(xiàn)為細(xì)胞皺縮、僵化,形態(tài)不規(guī)則,折光增強(qiáng)、貼壁細(xì)胞出現(xiàn)漂浮,隨作用時(shí)間延長(zhǎng),漂浮細(xì)胞數(shù)量增多。與對(duì)照組相比,細(xì)胞增殖受到明顯抑制,細(xì)胞數(shù)量隨著時(shí)間和藥物
4、濃度的增加而下降;
MTT實(shí)驗(yàn)顯示,SGC 7901細(xì)胞在不同濃度wortmannin 干預(yù)下,隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng),藥物濃度的增加,SGC 7901細(xì)胞增殖抑制率進(jìn)行性增加,各干預(yù)組與DMSO對(duì)照組的增殖抑制率比較有顯著的差異性(P<0.05),其抑制SGC 7901細(xì)胞生長(zhǎng)具有時(shí)間、濃度依賴性;免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示,在不同濃度wortmannin 干預(yù)24 h后,SGC 7901細(xì)胞中Cyclin H、Cyclin E、
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