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文檔簡介
1、目的: 探討沉默Msi1基因表達(dá)對人胃癌SGC-7901細(xì)胞周期、增殖、凋亡、侵襲與轉(zhuǎn)移的影響。
方法: 針對Msi1 mRNA序列設(shè)計合成siRNA,轉(zhuǎn)染SGC-7901細(xì)胞。RT-PCR法檢測Msi1基因表達(dá);MTT法檢測Msi1 siRNA組SGC-7901細(xì)胞增殖;PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期、凋亡情況;Western blot檢測survivin蛋白、caspase3蛋白及mmp9蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
2、Msi1 siRNA能有效抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞中Msi1的表達(dá),與空白對照組比較,MTT結(jié)果示Msi1 siRNA組SGC-7901細(xì)胞生長、增殖速度減緩(p<0.05);PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示,Msi1 siRNA組凋亡率為(23.36%±0.75),高于空白對照組(1.52%±0.46)及脂質(zhì)體組(4.34%±0.98)(p<0.05);Msi1 siRNA組細(xì)胞聚集在G0/G1期,S期細(xì)胞減少(p<0.05);West
3、ern blot分析顯示,Msi1 siRNA組survivin、mmp9蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào)(p<0.05),而caspase3蛋白表達(dá)水平上調(diào)(p<0.05)。
結(jié)論:
1. Msi1 siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后可明顯抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞中Msi1基因的表達(dá)。
2. Msi1 siRNA抑制Msi1基因表達(dá)后,可抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,對G0/G1期有阻滯作用,還可能在胃癌
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