吉非替尼通過EGFR-AKT-β-catenin途徑抑制鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2009級(jí)博士學(xué)位論文吉非替尼通過EGFR／AKT／pcatenin途徑抑制鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞●●’1^●UCancerStemCellsareRegulatedbyEGFR／AKT／p—cateninSignalingandPreferentiallyInhibitedbyGefitinibinNasopharyngealCarcinoma課題來源：973項(xiàng)目(2010CB529400)專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主

2、席答辯委員會(huì)成員腫瘤學(xué)馬磊肖廣惠曾木圣教授教授陳系古教授鐘雪云教授趙彤教授姚開泰教授湛鳳凰教授李欣教授論文評(píng)閱人謝丹教授賀志敏教授陳龍華教授2012年4月20日廣州摘要經(jīng)過多年的努力，聯(lián)合應(yīng)用包括放療，化療和靶向治療等多種治療手段，療效始終在低水平徘徊。腫瘤干細(xì)胞理論對(duì)這一問題提出了新的理解和治療前景。即傳統(tǒng)的治療手段僅僅針對(duì)腫瘤細(xì)胞群體中的普通細(xì)胞，對(duì)腫瘤干細(xì)胞沒有作用。必須聯(lián)合應(yīng)用針對(duì)腫瘤干細(xì)胞的治療手段，才能夠最終達(dá)到治愈的水平。

3、已有研究對(duì)此進(jìn)行了一定的探討。通過側(cè)群細(xì)胞，CDl33和CD44[jH性細(xì)胞對(duì)鼻咽癌中的腫瘤干細(xì)胞進(jìn)行了分離與鑒別【1819]。而且證實(shí)放化療可以引起腫瘤細(xì)胞染色質(zhì)的混亂，從而富集腫瘤干細(xì)胞【20】。在這些研究基礎(chǔ)上對(duì)鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)理進(jìn)行進(jìn)一步研究，并發(fā)現(xiàn)具有抑制作用的手段具有重要的診療意義。通過本次研究我們?cè)噲D證明，EGFR／AKT／13catenin信號(hào)通路對(duì)鼻咽癌腫瘤于細(xì)胞具有重要的調(diào)節(jié)，EGFR受體酪氨酸激酶特異性抑制劑

4、吉非替尼對(duì)鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞具有選擇性抑制作用。研究?jī)?nèi)容及方法：一EGFR／AKT／f)catenin信號(hào)通路對(duì)鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞具有調(diào)節(jié)作用1采用免疫組化手段檢鋇tJEGFR受體在鼻咽癌組織中的表達(dá)，確實(shí)EGFR受體確實(shí)在鼻咽癌人體組織標(biāo)本中表達(dá)情況。采用WestenBlot方法檢灝]EGFR受體在鼻咽癌細(xì)胞株CNE1，CNE2，58F610B，HNE1，HONE1，C6661中的表達(dá)情況。2采用WestenBlot方法檢、狽OEGFR信

5、號(hào)通路分子在不同信號(hào)作用下在鼻咽癌細(xì)胞中的變化情況。選取CNE1，CNE2細(xì)胞株，分別用EGFR配體EGF，特異性抑制劑吉非替尼和PDl53035；AKT特異性抑制劑LY294002；ERK特異性抑制齊UPD032590等試劑進(jìn)行處理，檢測(cè)PEGFR，EGFR，PAKTAKTPERK，ERK等通路分子蛋白表達(dá)情況。3采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)pcmemn在EGFR配體EGF，特異性抑制劑吉非替尼，AKT特異性抑制劑LY294002作用下1