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文檔簡介
1、目的:
(1)通過回顧性前瞻研究,分析自發(fā)性早產(chǎn)中母體外周血有核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的分子特征;
(2)通過對早產(chǎn)基因mRNA表達(dá)譜分析,篩選出差異表達(dá)基因,為研究早產(chǎn)分子機(jī)制提供線索。
實(shí)驗(yàn)方法:
(1)基因表達(dá)譜分析:通過檢測21例原始樣本(10例自發(fā)性早產(chǎn)和11例足月妊娠)的mRNA表達(dá)譜,分析早產(chǎn)組和足月組間的基因表達(dá)特征,對其數(shù)據(jù)進(jìn)行整合分析;
(2)實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
2、:根據(jù)基因表達(dá)譜分析結(jié)果,挑選出13個(gè)上調(diào)差異基因,對其在另外46例獨(dú)立樣本(21例自發(fā)性早產(chǎn)和25例足月妊娠)中的表達(dá)水平進(jìn)行驗(yàn)證。
結(jié)果:
(1)基因表達(dá)譜分析結(jié)果:早產(chǎn)組中表達(dá)上調(diào)的基因241個(gè),主要參與炎癥、免疫應(yīng)答、細(xì)胞增殖、DNA復(fù)制、DNA代謝、RNA剪切、RNA代謝、染色質(zhì)組裝等生物學(xué)過程;表達(dá)下調(diào)的基因690個(gè),主要參與細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、離子轉(zhuǎn)運(yùn)、核酸分解代謝等生物學(xué)過程。
(2)RT-
3、PCR結(jié)果:選取差異最大的13個(gè)上調(diào)基因在獨(dú)立樣本中差異表達(dá)分析,早產(chǎn)組中NF1表達(dá)水平高于足月組(P<0.05,P=0.008),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;早產(chǎn)組中CAMK2D表達(dá)水平高于足月組(P<0.05,P=0.028),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
(1)自發(fā)性早產(chǎn)的發(fā)生過程可能與相關(guān)基因激活和抑制有關(guān);
(2)NF1和CAMK2D基因表達(dá)異常可能參與早產(chǎn)的病理生理變化,有望成為預(yù)測早產(chǎn)的候選分子標(biāo)志物
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