骨形態(tài)發(fā)生蛋白6(BMP-6)在豬卵泡中的表達(dá)及功能研究.pdf

1、卵泡的形成和發(fā)育情況是影響雌性哺乳動(dòng)物繁殖的一個(gè)重要方面。哺乳動(dòng)物卵泡發(fā)育是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，受到許多來(lái)自旁分泌、自分泌、鄰分泌和內(nèi)分泌因子以及信號(hào)通路的調(diào)控。近年來(lái)，已有報(bào)道表明BMP-6在嚙齒類(lèi)、反芻類(lèi)及人類(lèi)卵泡發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要作用，豬作為一種重要的經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，目前關(guān)于BMP-6在豬卵泡中的研究還很少。
　　 利用Western Blot和免疫熒光技術(shù)在豬成熟卵泡的卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞中檢測(cè)到BMP-6蛋白陽(yáng)性信號(hào)，表明BM

2、P-6在豬卵巢中表達(dá)并有可能影響卵泡發(fā)育。體外分離豬的卵母細(xì)胞，進(jìn)行成熟培養(yǎng)，在培養(yǎng)過(guò)程中添加BMP-6蛋白，結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加BMP-6蛋白的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，排出第一極體的卵母細(xì)胞數(shù)目顯著增多，提示BMP-6能夠促進(jìn)豬卵母細(xì)胞的體外成熟。體外分離豬的顆粒細(xì)胞，添加不同濃度的BMP-6蛋白進(jìn)行培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示外源添加的BMP-6蛋白能夠促進(jìn)顆粒細(xì)胞的體外增殖：收集不同濃度BMP-6培養(yǎng)的顆粒細(xì)胞，提取細(xì)胞總RNA和蛋白，用Real-ti

3、me PCR和Western Blot分別在mRNA水平和蛋白水平檢測(cè)孕酮合成過(guò)程中的兩個(gè)關(guān)鍵蛋白--StAR和3β-HSD基因的表達(dá)情況，結(jié)果顯示BMP-6以劑量依賴(lài)的方式抑制StAR和3β-HSD基因的表達(dá)，提示BMP-6能夠抑制顆粒細(xì)胞孕酮的合成。推測(cè)BMP-6可能通過(guò)促進(jìn)豬卵泡顆粒細(xì)胞的增殖和抑制顆粒細(xì)胞孕酮的合成，來(lái)抑制豬卵泡顆粒細(xì)胞的黃體化過(guò)程，抑制卵泡閉鎖，維持卵泡的正常生理功能。
　　 豬不僅作為一種重要的經(jīng)濟(jì)動(dòng)