雌激素對乳腺癌中骨形態(tài)發(fā)生蛋白—6的表達影響.pdf

1、目的:骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)屬于轉(zhuǎn)化生長因子(Transformation growth factor,TGF)-β超家族成員,其生物學功能不僅限于其誘導成骨活性,還涉及幾乎全身所有系統(tǒng)的發(fā)育、生長及分化等.最近的研究發(fā)現(xiàn)在BMP家族中,BMP-6能夠在多種腫瘤中異常表達,而且可能在腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了作用.因為雌激素同乳腺癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切,該實驗主要通過研究雌激素對乳腺

2、癌中BMP-6表達水平的影響,了解雌激素調(diào)控BMP-6方式,證實BMP-6在乳腺癌中的作用.方法:使用不同濃度的雌激素處理雌激素受體(ER)陽性的乳腺癌細胞MCF-7,72h后用半定量反轉(zhuǎn)錄PCR檢測BMP-6的表達,并以雌激素受體陰性的乳腺癌細胞MDA-MB-231為對照.同時構(gòu)建了人BMP-6啟動子的熒光素酶報告基因(BMP-6 Promotor Luciferase Report gene,BMP6 PLR)質(zhì)粒,并使用脂質(zhì)體瞬時

3、轉(zhuǎn)染該質(zhì)粒到MCF-7細胞中,通過檢測熒光素酶的表達水平,檢測雌激素對BMP-6啟動子活性的影響.結(jié)果:ER陽性乳腺癌細胞MCF-7的BMP-6表達水平顯著高于ER陰性的乳腺癌細胞MDA-MB-231(P<0.01).MCF-7細胞中,10<'-5>、10<'-7>mol/L的雌激素能夠促進BMP-6表達提高(P<0.05).在MDA-MB-231細胞中,雌激素無此作用.使用構(gòu)建的人BMP-6啟動子的熒光素酶報告基因(BMP6 PLR)