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文檔簡介
1、炭疽桿菌是人類歷史上第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的病原菌。炭疽桿菌的研究在近幾年取得了較大進(jìn)展，2003年炭疽桿菌的全基因組序列向全世界發(fā)布，意味著炭疽桿菌的研究進(jìn)入了一個(gè)新的發(fā)展階段。 炭疽桿菌芽胞外壁膠原樣蛋白(BclA)是芽胞外壁發(fā)狀菌絲的主要結(jié)構(gòu)成分，也是芽胞表面的主要免疫原蛋白。從國內(nèi)分離到的炭疽桿菌中克隆出BclA基因，并將已測序的BclA氨基酸序列與公布的BclA氨基酸序列進(jìn)行多態(tài)性分析，發(fā)現(xiàn)不同炭疽桿菌菌株間BclA氨基酸序列存
2、在規(guī)律性差異。 本研究根據(jù)已發(fā)表的炭疽桿菌菌株BclA基因序列設(shè)計(jì)引物，用PcR擴(kuò)增法從實(shí)驗(yàn)室分離的炭疽桿菌菌株MY中擴(kuò)增出1119bp的BclA基因序列，然后將純化的PCR產(chǎn)物按正確的閱讀框架克隆入pGEx-6p-1載體中的谷胱苷肽．G．轉(zhuǎn)移酶(GST)基因下游，用IPTG誘導(dǎo)實(shí)現(xiàn)其在大腸桿菌中的表達(dá)。SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示，表達(dá)的融合蛋白約為68kDa。將原核表達(dá)產(chǎn)物的蛋白經(jīng)切膠免疫BALB/c小鼠，并以經(jīng)谷胱苷肽活化
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